22.(2010·东北名校联考)(10分)如图中甲为固定化细胞的反应柱示意图,乙为凝胶色谱柱示意图,据图作答:

(1)甲图中代表固定化细胞的是________(填字母),若用此反应柱制作果酒,温度应控制在________为宜。若用甲装置制作果醋,则与生产果酒所不同的是需________,以保证醋酸菌代谢的需要。

(2)某研究性学习小组的同学利用甲装置用固定化的酵母细胞发酵无菌麦芽汁制作酒,发酵条件符合操作要求,10天后检查发酵瓶发现麦芽汁中酒味很淡,经分析问题出在酵母细胞固定化过程中,你认为可能的原因是:①______________________________________

②________________________________________________________________________。

(3)乙图中a、b均为蛋白质分子,其中先从色谱柱洗脱出来的是________,原因是__________________________________________________。在装填色谱柱时,除使凝胶装填均匀外,还要注意色谱柱内不能有________,否则会搅乱洗脱次序。

(4)用色谱柱分离血红蛋白时,应等到红色带谱接近图中________处时(填字母),用试管收集流出液。

答案:(1)b 18-25℃ 持续通入无菌空气(氧气)

(2)①海藻酸钠浓度太低,固定的酵母菌数量太少 ②将海藻酸钠融化时未等冷却就将活化的酵母菌液倒入,导致酵母菌死亡

(3)a 相对分子质量大的蛋白质,通过色谱柱的路程较短,移动速度较快 气泡

(4)d

20.(2010·青岛摸底)(8分)PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝的分子生物学技术。PCR需要模板DNA、引物、脱氧核糖核苷酸和DNA聚合酶等条件。下图为模板DNA分子及2种引物,请回答相关问题:

 

(1)PCR的全称是________。PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度环境的不同,在PCR中先用95℃高温处理的目的是________________________________________________________________________;

而这一过程中在细胞内是通过________实现的。

(2)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________。请在图中绘出引物结合的位置。

(3)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。

(4)DNA子链复制的方向是________,这是由于________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

解析:本题考查考生对PCR技术的理解,属于知识识记和理解层次的考查,符合高考对选修内容考查的特点。PCR技术又称多聚酶链式反应,在PCR中选用95℃高温处理的目的是使DNA分子中的氢键断裂,两条链解开,即使DNA分子变性。引物是一种单链DNA或RNA分子,它能与解开的DNA母链的3′端结合,为DNA聚合酶提供吸附位点,使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸,从而决定了DNA子链复制的方向是5′到3′。在DNA分子扩增时,需要2种引物,由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点,故所需的引物数目等于新合成的DNA子链数目,即(2×210-2)=(211-2)个。

答案:(1)多聚酶链式反应 使DNA变性(使DNA的两条链解开) 解旋酶的催化

(2)单链DNA或RNA分子 见下图

 

(3)(211-2)

(4)5′到3′ DNA聚合酶只能从引物的3′端拼接单个脱氧核苷酸分子

18.(2010·苏北四市调研二)(8分)酵母菌生长的最适宜温度在20℃-30℃之间,能在pH为3-7.5的范围内生长,在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖,大约每1.5-2 h增殖一代。某研究性学习小组据此探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化,进行了如下实验,实验操作步骤如下:

第一步:配制无菌马铃薯葡萄糖培养液,活化酵母菌液。

第二步:利用相同的多套装置,按下表步骤操作。

装置编号
A
B
C
D
装置容器
内的溶液
无菌马铃薯葡萄糖
培养液/mL
10
10
5
5
无菌水/mL
-
-
5
5
活化酵母菌液/mL
0.1
0.1
0.1
0.1
温度(℃)
5
25
5
25

第三步:用血球计数板计数装置中起始的酵母菌数目,做好记录。

第四步:将各装置放在条件相同且适宜的条件下培养。

第五步:连续7天,每天随机抽时间取样计数,做好记录。

回答下列问题:

(1)改正实验操作步骤中的一处错误_______________________________。

(2)某同学第5天在使用血球计数板计数时的做法如下:

①振荡摇匀试管中的培养液,取1 mL并适当稀释(稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液)。

②先将________放在计数室上,用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘,让培养液自行渗入,多余培养液________,制作好临时装片。

③显微镜下观察计数:在观察计数时只计算________(被、不被)染成蓝色的酵母菌。

(3)如所使用的血球计数板有16个中方格,每1中方格中有25个小方格,每1个小方格的容积为0.1 mm3(1 mL=1000 mm3)。请推导出1 mL培养液中酵母菌细胞的计算公式:酵母细胞个数/mL=________。

答案:(1)第五步中应每天同一时间(定时)取样

(2)②盖玻片 用滤纸(吸水纸)吸去 ③不被

(3)平均每个小方格的酵母菌数×400×104×稀释倍数

17.(2010·苏锡常镇调研)(8分)CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA(总DNA)的技术。CTAB能跟核酸形成复合物,在高盐溶液(>0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在,当降低溶液中盐的浓度(<0.3 mol/L的NaCl溶液)时,CTAB-核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀,再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB;氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下:

①在50  mL离心管中加入20 mL的CTAB抽提缓冲液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB),于65℃水浴中预热;

②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中,用液氮速冻并研磨成粉末,加入上述离心管中,于65℃水浴中保温30 min;

③取出离心管,冷却至室温,加入20 mL的氯仿,轻轻混匀20 min;

④在室温下以12000 r/min的转速离心10-20 min;

⑤将上清液移入另一个离心管中,加入2/3体积的经冷却的异丙醇,用玻璃棒轻轻搅动,小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB-核酸的复合物沉淀;

⑥将沉淀移入另一个离心管中,加入70%乙醇洗涤,重复洗涤1-2次;

⑦吹干乙醇后,将DNA溶于适量的TE缓冲液中,在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在核酸紫外检测仪上观察。

请回答下列问题:

(1)植物基因组DNA(总DNA)的提取通常采用机械研磨的方法,常温下研磨时,植物细胞匀浆中含有的多种酶会对DNA的提取产生不利影响。用液氮速冻,材料在研磨时易破碎,同时还具有_______________________________。

(2)实验步骤③、④的目的是________________________________。

(3)实验步骤⑤中,玻璃棒上出现沉淀的主要原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)对DNA进行定性检测常用的试剂是________,琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及________、________,使带电分子产生________而实现分离。DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,利用核酸紫外检测仪可以进行________。

答案:(1)降低细胞匀浆中酶的活性,避免对DNA的提取产生不利的影响

(2)去除溶液中的蛋白质(使蛋白质变性和沉淀)

(3)NaCl溶液的浓度<0.3 mol/L,CTAB-核酸的复合物因溶解度降低而沉淀

(4)二苯胺 分子大小 形状的不同 不同的迁移速度 DNA含量的测定(或检测DNA)

 0  212880  212888  212894  212898  212904  212906  212910  212916  212918  212924  212930  212934  212936  212940  212946  212948  212954  212958  212960  212964  212966  212970  212972  212974  212975  212976  212978  212979  212980  212982  212984  212988  212990  212994  212996  213000  213006  213008  213014  213018  213020  213024  213030  213036  213038  213044  213048  213050  213056  213060  213066  213074  447348 

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