8.　 (08高考·全国卷Ⅱ)下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是(　 )

A. 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列　

B. 限制性内切酶的活性受温度的影响

C. 限制性内切酶能识别和切割RNA　　　

D. 限制性内切酶可从原核生物中提取

7.　 有关基因工程的叙述正确的是(　 )

A.　 DNA聚合酶可连接磷酸二酯键，因此可代替DNA连接酶来进行连接

B.　 基因运载体上的抗性基因的主要作用是提高受体细胞在自然环境中耐热性

C.　 运载体的作用是可以完成目的基因的转运、扩增、表达、确定在染色体上基因间的排列顺序

D.　 不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，充分体现了酶的专一性

6.　 下列有关内容的叙述中，体现利用DNA分子杂交原理的是(　 )

①观察DNA在细胞中的分布　 ②检测目的基因是否导入到受体细胞　 ③研究与分泌蛋白有关的细胞结构　 ④检测目的基因是否完全进行转录和翻译　 ⑤检测目的基因能否进行转录　 ⑥检测个体是否具有某种特性

A. ①③　　 B.　 ②④　 C.　 ②⑤　 D.　 ⑤⑥

5.　 我国上海研究所合成一种具有镇痛作用而又不会使病人上瘾的药物--脑啡呔多糖(类似人类中的糖蛋白)。如要采用基因工程和发酵技术让微生物来生产脑啡呔多糖，应选哪种微生物为受体细胞(　 )

A. 大肠杆菌　 B. 大肠杆菌质粒

C. T4噬菌体　 D. 酵母菌

4.　 现有一长度为1 000碱基对(by)的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco RI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpnl单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI,Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是(　 )

3.　 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是(　 )

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中

②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中

③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养

④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵

A. ①②　 B. ②③　 C. ③④　 D. ①④

2.　 镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是(　 )

A. 限制酶　　　 B. DNA连接酶

C. 解旋酶　　　 D. RNA聚合酶

1.　 在基因工程操作过程中，E·coli DNA连接酶的作用是(　 )

A.　 将任意两个DNA分子连接起来

B.　 连接具有相同黏性末端的DNA分子，包括DNA分子的基本骨架和碱基对之间的氢键

C.　 只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键

D.　 只连接具有相同黏性末端的DNA分子碱基对之间的氢键

(三)不同的化学物质，其理化特性不同，提取方法也有所差异，如胡萝卜素不溶于水，易溶于　　　　　 　，因此可以用　　　　　　　　　 　方法进行提取。

7. (20分)多聚酶链式反应(PCR)是一种在体外将少量DNA大量复制的技术。此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶。请回答下列有关问题：

(1)TaqDNA聚合酶的作用是　　　　　　　　　　 ，且只能由　　　　 　端开始。

(2)PCR反应除需提供耐热的DNA聚合酶外，还需提供：　　　 、　　 、　　 ，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。

(3)“PCR”与人体内DNA复制相比，有何特殊之处?

。

(4)实验室中微生物的筛选，应用了Taq细菌能在热泉中生长的原理，人为提供有利于目的菌株生长的条件：　　　 、　　 、　　　 等。

(5)微生物培养转为固体培养时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是　　　　 ，操作时采用 　　　　　灭菌的方法。

(6)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是　　　　 。

8. (20分)近20年来，PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规实验手段，根据下图完成相关题目。

　(1)PCR技术能把某一DNA分子片段进行扩增，它是利用了DNA的　　　 的原理，通过控制　　 来控制DNA的　　　　 与结合。

(2)利用PCR技术扩增DNA的过程中还需要　　　　　　　 酶的作用，但它必需要在相应的 　　　　的作用下才能完成对DNA的复制。假有一段DNA序列为：

5 ′-GTTAACCTTAG-3′

3 ′-CAATTGGAATC-5′

所用引物Ⅰ为：5′-GTTA-OH，则引物Ⅱ为：

。

(3)催化①过程的酶是；核酸酶H的作用是

。

(4)③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90-95 ℃时才能完成，说明DNA分子具有　　　　 性。

(5)由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是　　　　　　 ，两者在作用特性上的区别是　　　　　　 。

(6)如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶　　　 个。

9. (20分)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题：

凝胶色谱操作

(1)将实验流程补充完整：A为　　　　　 ，B为　　　　　 。凝胶色谱法的基本原理是根据　　　　　　　　　 而达到蛋白质分离的有效方法。

(2)洗涤红细胞的目的是去除　　　 ，洗涤次数过少，无法除去　　　 ；离心速度过高和时间过长会使　　　　 一同沉淀，达不到分离的效果。洗涤干净的标志是　　　　 。释放血红蛋白的过程中起作用的是　　　　　　　　　　　 。

(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol／L的磷酸缓冲液(pH为7. 0)的目的

是　　　　　　　　　　　　　　 。如果红色区带　　　　　 　，说明色谱柱制作成功。

10. (08高考·宁夏)(12分)已知蛋白质混合液中硫酸铵浓度的不同可以使不同种类的蛋白质析出(或沉淀)，随着硫酸铵浓度增加，混合液中蛋白质析出的种类和总量增加。下表是某蛋白质混合液中的不同蛋白质从开始析出到完全析出所需要的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围。

请据表回答：

(1)若只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度应为 　　　　　　　　　。

(2)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使混合液中的硫酸铵浓度达到30%，会析出若干种蛋白质，它们分别是　　　　　　　　　　 　。

(3)通过改变混合液中的硫酸铵浓度　　　　　　　　 　(填“能”或“不能”)从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白，原因是　　　　　　　　　　　　 　。

(4)简要写出从该蛋白质混合液中分离出全部丁蛋白的实验设计思路。

(5)如果蛋白质析出物中还含有一定量的硫酸铵，可用半透膜除去析出物中的硫酸铵。用半透膜能除去析出物中硫酸铵的原理是　　　　　　　　　　　　　　 　。

(二)血红蛋白的提取和分离

　(1)在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离、纯化和纯度鉴定时，都会用到缓冲溶液，其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。

(2)在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是　　　　　　　　　　　　　　 　。