3. 尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如图所示。请分析回答问题:
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KH2PO4 |
1.4 g |
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Na2HPO4 |
2.1 g |
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MgSO4·7H2O |
0.2 g |
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葡萄糖 |
10 g |
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尿素 |
1 g |
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琼脂 |
1.5 g |
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将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到100
mL |
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(1)此培养基能否用于植物组织培养?________,理由是________。
(2)培养基中加入尿素的目的是筛选________,这种培养基属于________培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验需要振荡培养,原因是________________。
(4)转为固体培养时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)下列材料或用具中:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手。需要灭菌的是:________;需要消毒的是:________。(填序号)
(6)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________(填序号)。
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误④没有设置对照
(7)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理:________________________________________________________________________,________________________________________________________________________。
解析:(1)考查微生物培养与植物组织培养的培养基的区别。配制培养基需要根据培养的生物营养需求情况,确定其成分及比例。植物组织培养需要有满足植物细胞生长所必需的营养和植物激素等条件。(2)培养基中加入尿素能够筛选出能分解尿素的细菌,属于选择培养基。(3)尿素为该细菌提供氮源,葡萄糖为该细菌提供碳源。振荡培养基可溶入氧气,供培养的目的菌提供必需的氧气。,(6)培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。
答案:(1)不能 缺少多种必需的矿质元素 (2)目的菌 选择 (3)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气 (4)涂布平板(划线) (5)①和② ③ (6)①②③ (7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,pH增高,使酚红指示剂变红