12. 有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究和应用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵生产,为了提高酶的产量,请你设计一个实验,利用诱变育种的方法,获得产生纤维素酶较多的菌株。

(1)写出实验步骤:①将培养好的生产菌株分成两组,________。

②制备含有________的固体培养基。③_____________________________________________________________________________________________________________________________________________。④______________________________________________________________________。

(1)  预期实验结果及结论:①诱变组中菌落周围的透明圈比对照组________,

说明__________________________________________________________。

②诱变组中菌落周围的透明圈与对照组________,说明___________________________。

③诱变组中菌落周围的透明圈比对照组小,说明_________________________________。

(2)  若获得纯净的高产菌株,需进行________或________操作。

解析:本题主要考查了学生设计实验的能力和刚果红染色法。(1)设计实验要遵循对照原则和单一变量原则,且要得到高产纤维素酶的菌株,先进行诱变处理,由于突变是不定向的,所以要经过筛选。实验分两组,实验组用诱变剂处理,对照组不进行处理。要检测纤维素分解菌产生纤维素酶的能力,应用含纤维素的鉴别培养基,根据形成的透明圈的大小,来判断产酶能力的高低。整个过程中,注意对照组和实验组的其他条件完全相同。(2)预期实验结果,诱变组和对照组相比,透明圈大小可能相同,可能较大,可能较小,所以需要分情况讨论,当然,真正想得到的是透明圈较大的菌株,即产纤维素酶能力强的菌株。(3)一般初次分离得到的都不是纯净的细菌,需进一步纯化培养,可通过平板划线法或稀释涂布平板法进行纯化培养。

答案:(1)①一组用一定剂量的诱变剂处理,另一组不处理作为对照 ②纤维素 ③把诱变组的大量菌株接种到多个含有纤维素的固体培养基上,同时接种对照组(未处理)的菌株,把它们置于相同的适宜条件下培养 ④一段时间后,取培养基用刚果红染色,观察记录菌落周围透明圈的大小情况

 (2)①大 诱变育种获得了高纤维素酶产量的菌株,②相同 诱变育种没有使菌株发生变化 ③诱变育种获得了低纤维素酶产量的菌株,(3)平板划线 稀释涂布平板

11. (2010·广东广州六中月考)在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。

(1)如图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。

(2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述________成分,并加入________物质,以补充________源。如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标,至少要加入________和________。

(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:,甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248;乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233;丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;在三位同学的统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确。

(4)若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233,那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)________。

答案;(1)平板划线 稀释 (2)NaNO3 尿素和葡萄糖,氮、碳 伊红 美蓝 (3)甲同学只涂布了两个平板,实验数据说服力不够;丙同学虽然涂布了三个平板,但其中一个平板的计数结果与另两个相差太远,说明操作过程出现错误,实验数据缺乏正确性。 (4)1.17×109

10. 富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同,制定环境条件使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点,从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择,如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

(1)本实验所需培养基为_____________________________________________________,碳源为__________________。

(2)实验原理是_____________________________________________________________。

(3)①→③重复培养的目的是_________________________________________________。

(4)⑤的菌落中大部分是降解________的微生物。

(5)⑥为__________组,⑦为________组,设置⑥的目的是_________________________。

(6) ⑤→⑥采用________法,接种到⑥的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是___________________________________________________________________。

解析:富集培养的培养基是一种选择培养基,可用于具有某种代谢特点的微生物,本题就是为了选择出能分解对羟基苯甲酸的微生物。该实验的培养基的碳源为对羟基苯甲酸;全过程包括筛选―→扩大培养―→纯化―→鉴定。

答案:(1)选择培养基 对羟基苯甲酸 (2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基,经富集培养,选择出能降解对羟基苯甲酸的微生物 (3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例 (4)对羟基苯甲酸 (5)对照 实验,说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物 (6)单细胞挑取 接种环在火焰上灼烧灭菌,烧红的接种环在空气中冷却,同时打开皿盖挑取菌种接种到试管中,并塞好棉塞,接种环在火焰上灼烧,杀灭残留物

9. 某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题:

(1)对买回来的菌种进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料:________、________、________、________、________。其中提供氮源的是________________________;提供碳源的主要物质是_______________________。

(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止__________________。

(3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________中灭菌,压力________kPa,温度________,时间________。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应____________________。

(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入________。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。

(5)从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯________(“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环________后蘸取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管在适温下培养,长成菌落后放入________℃冰箱中保藏。

解析:本题主要考查对食用菌菌种扩大培养并保存的过程中涉及到的培养基配制、灭菌及菌种转移和保藏的一些基础知识。

(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方

牛肉膏
蛋白胨
NaCl
琼脂
蒸馏水
5.0 g
10.0 g
5.0 g
20.0 g
定容至1 000 mL

由配方可知所需的原料;凡能提供所需氮元素的物质为氮源,牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。

(2)在配制培养基时营养要协调,按所培养微生物对各种成分的需求确定;在加入琼脂后,要不断搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

(3)玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅,在压力为100 kPa、温度为121 ℃条件下,灭菌15-30 min。若棉塞上沾有培养基,易被杂菌污染,应作废。

(4)不加水,无从谈起高压蒸汽,还有可能损坏设备。

(5)酒精灯外焰温度高,灭菌效果好。灼烧后待冷却再蘸取菌种,否则会烫死菌种造成实验失败。

答案:(1)牛肉膏 蛋白胨 水 无机盐 琼脂 蛋白胨、牛肉膏 牛肉膏 (2)比例 搅拌 琼脂糊底引起烧杯破裂 (3)高压蒸汽灭菌锅 100 121℃ 15-30 min 废弃 (4)适量水 (5)外 冷却 4

8. 科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,受到研究者重视。

(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法,其原理是根据蛋白质分子的________、大小及形状不同,在电场中的________不同而实现分离。

(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。

(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后,比较两种培养基中菌落的________,确定该蛋白质的抗菌效果。

(4)细菌培养常用的接种方法有________和________。实验结束后,对使用过的培养基应进行________处理。

解析:本题考查《生物技术实践》中的基础知识,知识点覆盖面大,答案容易组织。有关物质的分离与提取方法,涉及分离蛋白质的电泳法--电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。有关微生物培养基的成分、种类与作用,涉及牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏与蛋白胨分别为微生物提供碳源、氮源和维生素。有关微生物的接种和培养方法,常采用平板划线法和稀释涂布平板法对细菌进行接种。为防止细菌的污染,实验结束后要对用过的培养基作灭菌处理。

答案:(1)电荷(带电情况) 迁移速度 (2)碳源 氮源 (3)数量 (4)平板划线法 稀释涂布平板法(稀释混合平板法) 灭菌

 0  211872  211880  211886  211890  211896  211898  211902  211908  211910  211916  211922  211926  211928  211932  211938  211940  211946  211950  211952  211956  211958  211962  211964  211966  211967  211968  211970  211971  211972  211974  211976  211980  211982  211986  211988  211992  211998  212000  212006  212010  212012  212016  212022  212028  212030  212036  212040  212042  212048  212052  212058  212066  447348 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网