6．(2010年烟台模拟)植物体细胞杂交能解决不同种植物之间由于生殖隔离而不能进行有性杂交的问题。植物体细胞杂交过程不涉及(　)

A．使用限制性核酸内切酶

B．使用纤维素酶和果胶酶

C．诱导两种不同的细胞融合

D．选择利于杂种细胞分裂和分化的培养基

解析：选A。植物体细胞杂交首先要获取不同植物的体细胞，然后促其融合，最后将杂种细胞培育成新植物体。限制性核酸内切酶主要应用于基因工程。

5．下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是(多选)(　)

A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞

B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织

C．融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜

D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性

解析：选AD。植物细胞只有在离体条件下，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，才能表现出全能性；离体之后，植物细胞要经过脱分化，形成无定形状态的薄壁细胞即愈伤组织；愈伤组织经再分化过程可形成幼小植物。另外，植物细胞融合之前必须要用酶解法去除细胞壁，否则不会成功。

4.如图所示是人工种子的结构简图，对其叙述不正确的是(　)

A．人工种子的胚乳中含有胚状体发育所需要的营养物质，还可以添加农药和植物激素

B．人工种子胚状体还未分化出胚芽、胚轴和胚根等结构

C．人工种子可以工业化生产，播种了人工种子可节省大量粮食

D．人工种子克服了有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题

解析：选B。解答该题需要明确人工种子的概念。所谓人工种子，就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。人工种子在适宜的条件下同样能够萌发长成幼苗，可见，人工种子的胚状体已经分化出胚芽、胚轴、胚根等结构。

3．在植物体细胞杂交技术中，常用来除去细胞壁的酶是纤维素酶和果胶酶，这是因为(　)

A．这些酶容易制取

B．细胞壁的主要成分是纤维素和果胶

C．纤维素酶和果胶酶价格低廉

D．使用这些酶易于操作

解析：选B。酶的专一性。

2．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的(　)

A.0　　　　　　B．1

C．2 　　　　　　　　　　　D．3

解析：选B。植物体细胞杂交过程去除细胞壁制备有活力的原生质体的方法是酶解法。

1.(2009年高考全国卷Ⅰ)下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是(　)

A．利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种

B．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程

C．两个不同品种的紫茉莉杂交，正交、反交所得F₁的表现型一致

D．两个不同品种的紫茉莉杂交，F₁的遗传物质来自母本的多于来自父本的

解析：选C。植物体细胞杂交利用细胞膜的流动性使不同物种的两个细胞的原生质体融合在一起，经组织培养形成杂种植株，克服了不同物种之间的生殖隔离，A、B选项正确；紫茉莉枝条颜色的遗传为细胞质遗传，正交、反交的结果是不同的，F₁的遗传物质中细胞核遗传物质一半来自母本，一半来自父本，细胞质遗传物质几乎全部来自母本，D选项正确，C选项错误。

10．我国科学在山东莱阳农学院培育出克隆牛“康康”和“双双”的过程如下图所示，请分析完成下列问题：

(1)a、b所示的生物技术分别是________________________和________________________。

(2)“康康”和“双双”之间能否进行器官移植？为什么？

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

(3)实施细胞工程时，所需要的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是______________________________________________________。

(4)“康康”和“双双”能够培养成功说明了什么问题？

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

解析：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，图中所示a为细胞核移植，b胚胎移植。图中的“康康”和“双双”是获得早期胚胎后进行分割移植而得到的个体，来源于同一个细胞，其体内遗传物质几乎完全相同，在进行器官移植时不会发生排斥反应；实施动物细胞工程时，一般采用卵细胞，原因是卵细胞的体积大，易操作，卵细胞中含有使细胞核的全能性表现出来的物质。“康康”和“双双”的获得是取牛体细胞核经培养而获得的个体，说明了动物细胞的细胞核也具有全能性。

答案：(1)细胞核移植　胚胎移植

(2)能。它们具有几乎完全相同的遗传物质，移植后不会发生免疫排斥。

(3)①卵细胞体积大，易操作；②卵细胞中含有能使细胞核的全能体现出来的物质

(4)说明了动物细胞核也具有全能性。

9．科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下相关问题：

(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是________。

(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是____________。第2次筛选的目的是____________。

(3)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答：

①酶A是指　　　　，酶B是指　　　　。

②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是　　　　；题目中Ⅱ所指的细胞是　　，Ⅲ所指的细胞具有的特点是___________________________________________________________。

(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：

答案：(1)灭活的病毒

(2)筛选出杂交瘤细胞　筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞

(3)①限制性核酸内切酶　DNA连接酶

②检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达(或检测受体细胞是否显示出目的基因控制的性状)

浆细胞　既能无限增殖又能产生特定抗体

(4)见图

8．下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题。

(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异　　；从免疫学角度看，这种凝集原是_______________________________________。

(2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的　细胞，这种细胞具有产生________________________________________的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能　　，但不会产生抗体。

(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为____________________。把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为________。

(4)过程①的主要目的是__________________________________。

通过过程②或③的培养方法能产生大量________抗体。

解析：单克隆抗体的制备实际上是集中了B细胞可以产生单一抗体和骨髓瘤细胞可以无限增殖的特点，二者细胞融合形成的杂交瘤细胞既可无限增殖又可产生单一抗体。

答案：(1)糖蛋白　抗原

(2)免疫B淋巴　单一的抗A抗体(或单一的特异性抗体)　快速大量增殖

(3)杂交瘤细胞　单克隆

(4)筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞　抗A单克隆

7．(2008年高考宁夏卷)回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现____________________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面的糖蛋白的量________。

(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是___________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________。

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。

(5)在细胞培养过程中，通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中________的活性降低，细胞________的速率降低。

(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象， 这是因为机体把移植的皮肤组织当做________进行攻击。

解析：(1)动物细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点，若要传代培养应先用胰蛋白酶处理，使其从瓶壁上分离下来。

(2)在传代培养过程中，随着传代次数的增多，绝大多数细胞停止分裂，进而出现衰老甚至死亡，极少数细胞遗传物质发生改变，克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这种细胞黏着性降低，细胞膜表面的糖蛋白减少。

(3)活细胞的细胞膜具有选择透过性，而死细胞的细胞膜则没有这种特性，所以大分子染料可以对死细胞染色而不能对活细胞染色。

(4)若要观察染色体的数目，最好选择细胞分裂中期的细胞，因为分裂中期染色体螺旋程度最高，形态固定，数目清晰。

(5)低温可以降低酶的活性，从而降低细胞的新陈代谢速率。

(6)皮肤移植后发生排斥反应，是因为机体把移植的皮肤组织当做抗原进行攻击。

答案：(1)相互接触　接触抑制　单层(或一层)　胰蛋白酶

(2)衰老甚至死亡　不死性　降低　减少

(3)活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而使其着色)

(4)中

(5)冷冻(或超低温、液氮)　酶　新陈代谢

(6)抗原