3、科学家从某些能无限增殖的细胞细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下相关问题。

(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒。

(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞。第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

(3)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答：

①酶A是指限制性核酸内切酶，酶B是指DNA连接酶。

②对已导入重组质粒的“Ⅱ”进行“检测”的目的是检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达(或检测受体细胞是否显示出目的基因控制的性状)。题目中Ⅱ所指的细胞是浆细胞，Ⅲ所指的细胞具有的特点是既能无限增殖又能产生特定的抗体。

(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示用文字表示该过程：

(5)可利用单抗作为特异探针，来研究相应抗原蛋白的结构和功能。

[高考模拟]

2、将小鼠细胞和人体细胞融合成杂交细胞后，各自的表面蛋白质平均分配到膜表面(如图)，该实验说明了细胞膜(　 B　 )

A、由蛋白质分子和磷脂分子组成

B、具有一定的流动性

C、具有选择透过性

D、具有保护细胞内部的作用

	植物体细胞杂交	动物细胞融合(单克隆抗体制备)
理论基础 (原理)	细胞膜的流动性、 细胞的全能性	细胞膜的流动性、 细胞增殖
融合前 处理	酶解法去除细胞壁 (纤维素酶、果胶酶)	注射特定抗原免疫处理正常小鼠
促融	(1)物理法：电刺激等 (2)化学法：聚乙二醇(PEG)	(1)物化法：与植物细胞融合相同 (2)生物法：灭活的仙台病毒
过程	第 一 步	原生质体 的制备 (酶解法)			正常小鼠 的免疫 处理
第 二 步	原生质体 融合 (物化法)	动物细胞 融合(物 化生法)
第 三 步	杂种细胞 的筛选 与培养	杂交瘤细 胞的筛选 与培养
第 四 步	杂种植株 的诱导 与鉴定	单克隆 抗体的 提纯
优点	克服植物远缘杂交不亲和的障碍	从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中 获得单抗

[基础训练]

1、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是(　 B　 )

A、将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞

B、用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞

C、用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D、筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体

杂交瘤技术制备单克隆抗体。

灭活的仙台病毒、聚乙二醇、电刺激等。

指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。参与融合的细胞基因型可相同也可不同，但细胞杂交只能发生在基因型不同的细胞间。

(二)动物细胞核的移植技术

项目	细胞核的移植
概念	利用一个细胞的细胞核(供体核)来取代另一个细胞中的细胞核， 形成一个重建的“合子”
原理	动物体细胞核具有全能性
过程
意义	①有利于遗传疾病的治疗，优良品种的培育 ②对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义 ③降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率

[基础训练]1、某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：

(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量多。

(2)细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是维持培养液pH。

(3)药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更多。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶(胰酶)消化处理。

(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。

(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入一定量的药物Y溶液，B组细胞培养液中加入等量的无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的mRNA或蛋白质合成水平的差异，确定抗肿瘤药物Y的药效。

2、下列哪一项属于克隆(　 D　 )

A、将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中

B、将抗药性的某基因引入草履虫的细胞内

C、将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞

D、将某种瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系

3、一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能(　 D　 )

A、有选择地繁殖某一性别的家畜　　　　　　　　　　 B、繁殖家畜中的优秀个体

C、用于保存物种　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 D、改变动物的基因型

[高考模拟]4、(2007宁夏理综32B)现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。

(1)如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出细胞核注入B品种牛的去核卵母细胞，经过某些刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为重组胚胎，将该胚胎移入代孕母牛的子宫中，通过培育可达到目的。

(2)一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以用促性腺激素处理B品种母牛。

(3)克隆牛的产生说明动物体细胞核具有全能性。克隆牛的性状主要表现A品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自两个亲本，细胞质来自雌性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成不同(相同，不同)。

5、(2007江苏生物29)动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有(　 BCD　 )

A、正常细胞与癌细胞的增殖速率相同

B、有无血清对正常细胞培养的影响不同

C、培养基中补充血清有助于正常细胞的培养

D、培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大

(一)动物细胞全能性的表现程度：不同细胞全能性的表现程度不同，如：受精卵＞胚胎干细胞＞多能干细胞＞单能干细胞＞体细胞。

(三)与传统有性杂交相比，其优越性表现在：

1、克服植物远缘杂交不亲和的障碍。

2、打破物种之间的生殖隔离。

[基础训练]

1、细胞具有全能性的原因是(　 C　 )

A、体细胞具有发育成完整个体的潜能

B、生物体的每个细胞都具有全能性

C、生物体的每个细胞都含有个体发育的全部基因

D、生物体的每个细胞都是由受精卵发育来的

2、在植物细胞工程中，当原生质体融合成一个细胞后，需要诱导产生出细胞壁，参与这一过程的细胞器是(　 B　 )

A、叶绿体、高尔基体　　　　　　　　　　　　　　　　　　 B、线粒体、高尔基体

C、叶绿体、线粒体　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 D、线粒体、内质网

3、如图所示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作，接入试管后，在一定的条件下，形成试管苗的培育过程，请据图回答下列问题：

(1)要促进细胞分裂生长，培养基中应有营养物质和激素，营养物质包括无机物和小分子有机物；激素包括细胞分裂素和生长素两类植物激素。

(2)A和B阶段主要进行的分裂方式是有丝分裂，B阶段除了细胞分裂外，还进行细胞分化等。

(3)此过程要无菌操作，主要是指对培养基进行灭菌消毒。B阶段需要光照，原因是芽发育成叶，叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件。

(4)试管苗的根细胞没有叶绿素，而叶的叶肉细胞具有叶绿素，这是基因选择性表达的结果。

(5)试简要说明组织培养技术的优点，以及这一技术在实践中的具体应用(举例)。植物组织培养不仅从植物体上取材少、培养周期短、繁殖率高、保持母本优良性状，而且便于自动化管理。目前这项技术已经在花卉和果树的快速繁殖、生产细胞产品、单倍体育种等方面得到了广泛的应用。

[高考模拟]

4、(2007上海生物13)下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是(　 A　 )

A、花药、胚不能作为组织培养的材料　　　　　　 B、植物细胞具有全能性

C、外植体是指用于培养的植物组织或器官　　　 D、外植体可诱导出愈伤组织

5、(2008江苏生物20)下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是(　 D　 )

A、培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B、培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C、离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织

D、同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同

(二)过程：