4．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是(　)

A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同

B．有无血清对正常细胞培养的影响不同

C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养

D．培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大

解析：从图中曲线可看出培养基中有无血清对癌细胞的培养影响不大，二者在细胞数曲线上差不多。正常细胞的培养过程中有无血清所获得的细胞数差距较大，有血清的培养基在相同时间内培养得到的细胞数远远多于无血清的培养基所获得的细胞数。癌细胞培养与正常细胞培养二者的差距比较大，正常细胞达到一定的数目后不再增加，而癌细胞却能不断增加。

答案：A

3．制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括(　)

①细胞培养　②细胞融合　③胚胎移植　④细胞核移植

A．①② 　　　　　　　　　　　　　　　　　 B.　 ①③

C.　 ②③ 　　　　　　　　　　　　　 D.　 ③④

解析：单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体，整个过程不涉及胚胎移植和细胞核移植这两项技术。

答案：A

2．用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱蚊香草，使有驱蚊作用的香茅醛随着天竺葵的蒸腾作用散发到空气中，达到驱蚊的效果。下面有关培育过程的叙述，不正确的是(　)

A．原生质体的融合常用PEG作为诱导剂

B．形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型

C. 由杂种细胞→杂种植株，要通过有丝分裂和细胞的分化　

D．该项生物工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍

解析：植物体细胞杂交过程中，诱导原生质体融合常用的诱导剂是PEG；由杂种细胞→杂种植株，要通过有丝分裂、脱分化和再分化才能形成；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍。杂种细胞经组织培养形成的愈伤组织，自身不含叶绿素无法进行光合作用，其营养物质来自培养基，代谢类型是异养需氧型。　

答案：B

1．下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是(　)

A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压

B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化

C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织

D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同

解析：此题考查学生对植物组织培养技术的掌握。培养基中加入蔗糖的目的一方面可以提供营养，另一方面可以调节渗透压；在整个组织培养过程中影响再分化的关键是生长素和细胞分裂素的使用比例和使用顺序；组织培养过程中的第一个关键环节是脱分化，从而形成愈伤组织；组织培养的对象既可以是体细胞也可以是生殖细胞，因此获得的愈伤组织的基因组成不一定相同。

答案：D

12．如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题。

(1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是________技术，这两种动物繁殖的方式相比，实质性的区别为前者是________，后者是________。

(2)一般用________激素对供体母牛做超数排卵处理。

(3)卵裂体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________等物质。

(4)如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用________技术将药用蛋白基因导入到________中，在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是________技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定。

(5)纯种荷斯坦奶牛的胚胎能在受体黄牛的子宫内存活并正常发育的生理原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

解析：克隆动物采用的技术是核移植技术，为无性生殖；而题图所示的繁殖过程具有精卵结合形成卵裂的过程，应为有性生殖。促性腺激素能促进性激素的分泌，从而促进生殖器官的发育和生殖细胞的生成。早期胚胎的培养过程中，培养液中需加入动物血清。将目的基因导入动物细胞常用的技术是显微注射技术，受体细胞通常是卵裂，DNA分子杂交技术可用于检测目的基因是否导入。胚胎移植成功的生理原因是受体对外来胚胎不发生免疫排斥反应。

答案：(1)核移植　无性生殖　有性生殖　(2)促性腺　(3)动物血清　(4)显微注射　卵裂　DNA分子杂交

(5)受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系

11．(2010·南通一调)下图是“万能细胞”的诞生过程，图中OCT4、SOX2、NANOG和LIN28是在胚胎干细胞中能高度表达并决定其“全能性”的四个基因，将改造后的“万能细胞”植入小鼠身体上，植入的细胞长成了“肿瘤”，“肿瘤”中出现了神经、骨骼、肌肉等多种类型的细胞。请据图回答下列问题：

(1)胚胎干细胞又称ES细胞，是从________中分离出来的一类细胞，如果胚胎发育到了囊胚期，这时的________细胞就是ES细胞。

(2)胚胎干细胞在功能上具有发育的________。

(3)图中逆转录病毒的作用是____________，过程③利用了逆转录病毒的______________特性。

(4)“万能细胞”经体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，这样培育的特殊细胞或器官移回病人体内与异体器官移植相比，最大的优点是_____________________________。

(5)请说出一种胚胎干细胞的应用：_____________________________________________。

答案：(1)早期胚胎　内细胞团　(2)全能性

(3)作为基因工程的载体　感染(宿主细胞)　(4)不会产生免疫排斥反应　(5)用于研究细胞分化和细胞凋亡的机理；用于器官移植等(答出一种即可)

10．(2010·广州天河区二模)随着科学技术的发展，人们可以根据需求来改造生物的性状。如图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，据图回答：

(1)在此过程中涉及到的细胞水平现代生物技术手段主要有_______________________。

(2)在基因工程中，我们称②为________，在②进入③之前要用________等工具来构建基因表达载体，能实现②进入③的常用方法是________________。

(3)图中①一般经________处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用去核后未受精的卵细胞作为受体，而不用普通的体细胞，原因是______________________________

________________________________________________________________________。

(4)下列A-D中表示④到⑤过程中正确的操作方法的是________，把⑤送入⑥的最佳时期是________。

(5)⑦是⑥的后代，那么⑦的遗传性状和________最相似，为什么？________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

如果②的数量太少，常用________来扩增。要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求③的性染色体是________，利用该方法得到的动物叫做____________。

(6)用这种方法生产药物与工厂化生产药物相比，前者的优越性在于______________。

(7)⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物，这类转基因动物被称为________。

解析：基因工程的工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体，要将目的基因导入动物细胞常采用的方法是显微注射法。动物细胞培养时要用胰蛋白酶处理使组织中的各个细胞分散开来，之所以采用卵细胞作为受体细胞，这是因为卵细胞大、易操作、分化程度低，体细胞的细胞核在卵细胞质中才能表现出全能性。胚胎分割是将内细胞团等分成几等份，所以答案选B；胚胎移植的最佳时期是早期胚胎的桑椹胚或囊胚期。克隆牛与提供细胞核的个体性状最相似。要从乳汁中获取血清白蛋白，则该牛应该是产乳汁的雌牛，其性染色体是XX，这样通过导入目的基因的方法获得的动物叫转基因克隆动物。与工厂化生产药物相比，用转基因克隆动物生产药物的优越性在于节约资源、降低成本等。

答案：(1)核移植技术、动物细胞培养　(2)目的基因　限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体　显微注射法　(3)胰蛋白酶　卵细胞大、易操作、分化程度低，体细胞的细胞核在卵细胞质中才能表现出全能性　(4)B　桑椹胚期或囊胚期　(5)荷斯坦奶牛　因为个体⑦的核遗传物质大部分来自荷斯坦奶牛，⑥只是为胚胎发育提供营养和场所，⑦并没有获得⑥的遗传信息　PCR技术　XX　转基因克隆动物　(6)节约资源、降低成本等　(7)乳腺(房)生物反应器

9．(2010·徐州模拟)如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题：

(1)A细胞是________，在进行体外受精前要对精子进行________处理。

(2)进行胚胎分割时，应选择发育到________时期的胚胎进行操作。

(3)②指的是________。

(4)通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性状的根本原因是____________。

(5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意____________________________________。

(6)受体母牛必须和供体牛属于________。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______________________________。

解析：本题考查胚胎工程的应用。将获能精子与处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞融合即可得到卵裂，卵裂经过体外培养形成早期胚胎，为了快速繁育优良品种，可以采用胚胎分割的技术手段，即选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割，分割后产生的个体因为所含的遗传物质相同，所以性状表现很相似。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。大量的研究已经证明，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

答案：(1)(次级)卵母细胞　获能　(2)桑椹胚或囊胚

(3)囊胚腔　(4)具有相同的遗传物质

(5)胚胎分割要将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育　(6)同一物种　受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应

8．下图为牛胚胎性别鉴定和分割示意图，请据图完成下列问题：

(1)填出图中字母所代表的结构名称：

A________；B________；C________；D________；

(2)写出甲、乙、丙过程的技术名称：

甲________；乙________；丙________；进行乙过程时，所取的样本是________。

(3)进行甲过程时，所使用的基本仪器是________，本过程的技术关键是________。

(4)尽管胚胎分割技术在多种动物中取得成功，但仍然存在一些问题，如__________________等，同时很难取得同卵多胎，成功率较高的是________。

解析：(1)根据囊胚的结构可知图中字母所代表的结构名称分别是，A为囊胚腔；B为透明带；C为滋养层；D为内细胞团。(2)图中表示的甲、乙、丙过程的技术分别是胚胎分割、做DNA分析性别鉴定、胚胎移植。进行乙过程时，所采取的样本是滋养层。(3)进行甲过程时，所使用的基本仪器是显微操作仪和实体显微镜。本过程的技术关键是将内细胞团均等分割。(4)尽管胚胎分割技术在多种动物中已取得成功，但仍然存在一些问题，如刚出生的动物体重偏轻，毛色和斑纹上还存在差异等。同时很难取得同卵多胎，成功率较高的是同卵双胎。

答案：(1)囊胚腔　透明带　滋养层　内细胞团　(2)胚胎

分割　做DNA分析性别鉴定　胚胎移植　滋养层

(3)显微操作仪和实体显微镜　将内细胞团均等分割

(4)刚出生的动物体重偏轻，毛色和斑纹上还存在差异　同卵双胎

7．胚胎移植的基本程序如图(以牛胚胎移植为例)，请据图回答：

(1)对供体母牛、供体公牛的要求是____________________________________________。

(2)同期发情处理的方法是________，冲卵中的“卵”是指________。

(3)哺乳动物受精过程有下列中的________机制阻止多精子入卵受精(多选)(　)

A．精子获能具有差异性

B．精子穿越卵子透明带触及卵黄膜，导致透明带反应

C．精子触发卵黄膜表面微绒毛的抱合反应

D．精子入卵后，触发卵黄膜封闭作用

(4)受精有关过程有：①第一次卵裂开始，②释放第二极体，③顶体反应，④穿越透明带，⑤雌、雄原核的形成，⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为________(填序号)，受精的标志是________________。

(5)若供体母牛具有许多优良性状，可利用体细胞克隆技术加速遗传改良进程，请回答下列有关问题：

①目前核移植技术中普遍使用的去核方法是________________。

②用于核移植的体细胞一般选用________代以内的细胞，原因是________________________________________________________________________。

解析：(1)胚胎移植的供体公牛、供体母牛必须是具优良遗传性状的同种牛。

(2)胚胎移植首先要对供、受体母牛进行选择，并用激素进行同期发情处理，一般注射促性腺激素。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来。

(3)透明带反应是防止多个精子进入透明带引起多精子受精的第一道屏障；卵黄膜的封闭作用是防止多精子入卵受精的第二道屏障。

(4)受精过程为：①精卵相遇，发生顶体反应，精子穿过放射冠；②精子接触透明带；③精子穿过透明带，接触卵黄膜；④精子头膨胀，同时次级卵母细胞完成减数第二次分裂，释放第二极体；⑤雌、雄原核形成；⑥核膜消失，两个原核融合；⑦第一次卵裂即将开始。

(5)①目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法；②用于核移植的供体细胞一般都选用10代以内的细胞，10代以内的细胞一般能保证正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。

答案：(1)具优良性状的同种牛

(2)注射促性腺激素　早期胚胎　(3)BD

(4)③④②⑤⑥①　卵黄膜和透明带间出现两个极体

(5)①显微操作去核法　②10　10代以内的细胞一般能保证正常的二倍体核型