|
步 骤 |
注 意 问 题 |
分 析 |
|
一、根尖的培养 实验前3~4天,让洋葱放在广口瓶上,底部接触清水。根长约5cm时可用。 |
置于温暖处,常换水。 |
因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。 |
|
二、装片的制作 (解离→漂洗→染色→制片) 1.解离:上午10时至下午2时,剪取洋葱根尖2~3mm,立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室温下解离3~5min。 |
解离时间要保证,细胞才能分散开来。 解离时间也不宜过长。 |
目的:溶解细胞间质,使组织中的细胞相互分离开来。此时,细胞已被盐酸杀死。 否则,根尖过于酥软,无法取出。 |
|
2.漂洗:待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min。 |
漂洗要充分,可换水1~2次。 |
目的:洗去解离液,便于染色。 |
|
3.染色:把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。 |
染色时间不宜过长,否则显微镜下一片紫色,无法观察。 |
龙胆紫等为碱性染料,可使染色体着色。 醋酸洋红溶液也能使染色体着色 |
|
4.制片:用镊子将这段洋葱根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地压载玻片,使细胞分散开来。 |
要弄碎根尖,再垂直向下均匀用力压片,不可移动盖玻片, |
目的:使细胞分散,避免细胞重叠,便于观察。做得成功的装片,标本被压成云雾状。 |
|
三、观察 1.低倍镜观察:把装片放在低倍镜 下,慢慢移动装片,找到分生区细胞。 2.高倍镜观察:移走低倍镜,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,仔细观察,找出处于细胞分裂期中期的细胞,再找出前期、后期、末期的细胞。 |
一定要找到分生区。 在一个视野里,往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样,可以慢慢地移动装片,从邻近的分生区细胞中寻找。 |
分生区细胞特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正处于分裂期。 |
讨论:制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?
答:制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点:(1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间;(2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;(3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开。
实验十 观察细胞的减数分裂