回答下列实验探究的问题.
科学研究发现根的向地生长不仅与生长素有关,还与乙烯的作用有关.为了研究二者的关系,有人做了如下的实验:
将某种开花植物的根尖放在含不同浓度生长素的培养液中,并加入少量蔗糖作为能源.发现在这些培养液中出现了乙烯,且生长素浓度越高,培养液中乙烯的浓度也越高,根尖生长所受的抑制也越强.
(1)此实验中的自变量是
 
,因变量是
 
.需要严格控制的无关变量有
 
(至少举出两种).
(2)为使实验更严谨,还需将另一些等量的根尖放在
 
中,作为对照组.
(3)据此实验结果,推测水平放置的植物根向地生长的原因是
 

科学家研究发现,同种植物在高原地区长得较为矮小,原因是紫外光可促进生长素氧化分解,进而抑制植物生长.为验证紫外光抑制植物生长,请补充下列实验设计并完成相关的实验分析.
材料用具:燕麦幼苗,适宜浓度的完全培养液,蒸馏水,琼脂块,刀片若干,40W白炽灯和紫外灯管等.
(4)实验步骤
步骤一:准备2个配有培养支架的烧杯,分别标记为A、B.向A、B两烧杯中加入等量且适量的完全培养液.
步骤二:
 
,随机平均分成2组,分别放在A、B两烧杯中培养一段时间.
其中A为对照组,B为实验组.
步骤三:在培养过程中,A组用40W白炽灯照射,B组
 

步骤四:切下A、两组B幼苗的胚芽鞘尖端,分别用琼脂块收集生长素,并对应标记为a、b.将a、b置于
 
两侧,观察胚芽鞘的弯曲情况.
(5)结果预测:
 
研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究,肺部细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术基本流程如图所示,据图回答.

(1)在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体,原因是
 
;如果某质粒由1000个脱氧核苷酸组成,脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为
 

(2)图甲中在构建重组载体时,酶切目的基因和酶切质粒时,所用的限制酶可以不同,但是产生的粘性末端必须是
 

(3)图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是
 
,图乙中let-7基因转录过程需要的酶是
 
,这两种酶作用的化学键都是
 

(4)EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一,并只能在G与A之间切割.若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点,请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端.
 

(5)原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养.原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂,空间因素和营养因素会限制其进一步生长.此时就需要将培养物分割成小的部分(组织细胞分散开),重新接种到另外的培养器皿内再进行培养,这个过程就称为传代或者再培养.图甲中进行传代培养操作时,需要用
 
酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞,以利于传代培养.
(6)研究发现,let-7基因能影响RAS基因的表达,其影响机理如图乙所示.从分子水平的角度分析,其作用机理是
 

(7)如图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体.如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组,并将重组质粒导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌进行培养.为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌,现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图二的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置).与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是
 
,图三结果显示,多数大肠杆菌内导入的是
 

回答下列有关基因工程的问题.
肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术基本流程如图1.

(1)进行过程①时,需用
 
酶切开载体以插入let-7基因.
(2)进行过程 ②时,需用
 
酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于细胞培养.
(3)研究发现,let-7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2.据图分析,可从细胞中提取
 
进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录.肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中
 
(RASmRNA/RAS蛋白质)含量减少引起的.
(4)某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和SmaⅠ处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(kb为千个碱基对):
HindⅢ:2.5kb,5.0kb;             SmaⅠ:2.0kb,5.5kb;
HindⅢ和SmaⅠ:2.5kb,3.0kb,2.0kb;
限制酶HindⅢ和SmaⅠ在此DNA分子中各有
 
个识别序列.
两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶EcoRⅠ处理,结果导致凝胶上3.0kb的片段消失,产生一个1.5kb的新片段.将该DNA分子内部的限制酶HindⅢ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点标注在答题纸的指定位置.
 

(5)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,说明此DNA分子为
 
(线性或环状).用Kpn1单独酶切,得到400bp和600bp两种长度的DNA分子片段;用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子片段.该DNA分子的酶切图谱是
 
 0  110410  110418  110424  110428  110434  110436  110440  110446  110448  110454  110460  110464  110466  110470  110476  110478  110484  110488  110490  110494  110496  110500  110502  110504  110505  110506  110508  110509  110510  110512  110514  110518  110520  110524  110526  110530  110536  110538  110544  110548  110550  110554  110560  110566  110568  110574  110578  110580  110586  110590  110596  110604  170175 

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