Question

某中学杨老师自制大蒜提取液，希望这种简便、经济的提取液能够高效的杀灭餐具上的细菌，杨老师完成了下面的探究实验：
（1）制作提取液：杨老师将大蒜榨汁后制成提取液，具体做法如下表所示．请根据表中数据，在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量．

大蒜提取液编号	1#	2#
大蒜（g）	350	350
冷开水（mL）		880
无色食醋（mL）	/	20
制备量	1000mL	1000mL

（2）使用方法：将餐具浸泡在提取液中10min后取出冲洗．
（3）样品抽取：将经过

 

处理的滤纸贴在餐具表面l min，然后再将滤纸放到50ml无菌水中，充分振荡后制成原液．再取1mL原液加入

 

ml无菌水中摇匀制成10倍稀释液．
（4）分离及培养：用

 

法分离细菌．分别取1ml原液和10倍稀释液，分别加到伊红-美蓝培养基中，用灭菌、消毒后的

 

（用具），将原液和稀释液均匀涂布到整个平板上．每个浓度各做三个培养皿，其目的是

 

．本实验另设1m1无菌水涂布在未接种的培养皿为空白对照，原因是排除

 

．最后在37℃培养48h．
（5）观察记录：在下面的空白处，设计1#提取液实验组的观察记录表
（6）结果分析：统计数据，得到消毒前后的菌落总数变化（单位cfu/cm²，每平方厘米样品中含有的细菌菌落总数）

		总份数＜1   1-10   10-102   102-103  103-104＞104
1#提取液	消毒前	30    0     0      0       3       18     9
	消毒后	30    14    12     4       0        0     0
2#提取液	消毒前	33    2     0      0       3       12     16
	消毒后	33    19    10     4       0       0      0

根据消毒前后的数据可知

 

，2#提取液效果高于1#，分析可能的原因

 

请你给杨老师提出需要进一步研究的问题：

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养

专题：

分析：阅读题干和题图可知，本题是通过实验研究大蒜提取液的抑菌效果，梳理微生物实验室培养技术的相关知识点，然后根据问题涉及的具体内容分析解答．

解答： 解：（1）根据实验设置的单因子变量的原则，2#加入冷开水880ml，无色食醋20ml，对照实验不加食醋，加冷开水应是900ml．
（3）贴在餐具表面的滤纸，在贴上前要进行灭菌，防止滤纸上原有的微生物对实验结果造成影响；稀释原液时，1ml原液，加9ml无菌水，制成10倍稀释液．
（4）分离菌种和统计样品中的活菌数常用稀释涂布平板法，常用的工具是涂布器，玻璃刮刀或三角刮刀；每个浓度要凃三个平板，目的是重复实验，减小实验误差；另设一组空白对照，排除培养基灭菌不彻底对实验结果造成的影响．
（6）分析实验数据可知，不论是1#提取液还是2#提取液，消毒后，菌落数降低，说明大蒜提取液能够高效杀菌；且2#提取液效果高于1#，原因可能是无色食醋促使大蒜提取液成微酸性，协同杀菌；进一步研究的问题可以是进一步探究同等条件下，醋和蒜汁哪种消毒作用更好？不同浓度的大蒜汁，哪种消毒效果更好？醋作用的最适PH是多少？
故答案应为：
（1）900
（3）灭菌       9ml
（4）涂布分离（稀释涂布平板）           玻璃刮刀（三角刮刀、涂布器）       重复实验，减小实验误差       灭菌不彻底对本实验的影响
（5）

	菌落数
	1号培养皿	2号培养皿	3号培养皿	平均值
原液
10-1稀释液

（6）大蒜提取液能够高效杀菌          无色食醋促使大蒜提取液成微酸性，协同杀菌      ①进一步探究同等条件下，醋和蒜汁哪种消毒作用更好？②不同浓度的大蒜汁，哪种消毒效果更好？③醋作用的最适PH？

点评：本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物和统计活菌数常用的接种方法和接种工具，实验设置的单因子变量原则、对照原则、重复实验的原则，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力．