Question

19．制备培养基方法：将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内，加200mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀后，在酒精灯上加热．当蛋白胨、牛肉膏融化后，加入琼脂，用微火继续加热至琼脂溶化，补充水至200mL．用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0～7.2，分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌．当培养基的温度下降到50℃时，将其分装在5套培养皿中，当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理．将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2～3天，观察每个培养基中的细菌生长情况．请回答下列问题：

第1套	开盖，在空气中暴露10s
第2套	用手指接触培养基约10s
第3套	用硬币接触培养基约10s
第4套	用滤纸擦一下课桌，再接触培养基约10s
第5套	对照（不打开盖）

（1）该培养基中，蛋白胨提供的主要营养是氮源和维生素，此外，培养基中还必须含有的营养物质有水、无机盐和碳源．该培养基因其中加入了琼脂而被称为固体培养基，另外因含有牛肉膏、蛋白胨等成分而被称为天然培养基．
（2）除上述灭菌方法外，还可用干热灭菌和灼烧灭菌方法灭菌，其中后者主要适用于金属工具．以上方法能够杀死物体内外的所有的微生物，与之相比，消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体内外的部分微生物．
（3）在实验操作中，“当培养基的温度下降到50℃时，将其分装在5套培养皿中”的过程称为倒平板，“当培养基冷却至室温”后应该将平板倒置．试验中有三处特别强调温度控制，请简要说明其控制温度的科学道理：
①“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50℃”是防止培养基的温度过高使培养皿因受热不均而破裂．
②“当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理”防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物．
③“将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养”为细菌生长繁殖提供适宜的温度．

Answer 1

分析 微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，有些微生物还需要特殊的营养物质．微生物的培养还需要适宜的温度、pH及是否需要氧气等条件．培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类．培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类．培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类．培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基．

解答 解：（1）根据题意该培养基为牛肉膏-蛋白胨培养基，其中蛋白胨可以为微生物提供氮源和维生素．培养基中的营养物质主要有碳源、氮源、生长因子、水分、无机盐等．其中加入琼脂而凝固后被称为固体培养基，因含有牛肉膏、蛋白胨等成分而被称为天然培养基．
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌．消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程．
（3）题干中的操作称为倒平板，培养皿中的培养基冷凝后有关将平板倒置．
②当培养基冷却至室温，进行表中的操作是为了防止培养基温度过高杀死接种在其上的细菌（或微生物）．
③培养基皿于35℃的温度下培养是让细菌在适宜的温度下快速生长繁殖．
故答案为：
（1）氮源和维生素    碳源     固体培养基    天然培养基
（2）干热灭菌    灼烧灭菌    所有的微生物    较为温和的物理或化学   部分微生物
（3）倒平板    将平板倒置
②防止培养基温度过高杀死接种在其上的细菌（或微生物）
③让细菌在适宜的温度下快速生长繁殖

点评 本题主要考查微生物的营养物质和培养调节的控制，意在强化学生对相关知识的理解与掌握．