(二)考点例析

[例1]用来治疗糖尿病的胰岛素,过去主要靠从动物体器官、组织中提取,但因受原料限制,无法推广。现在,可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素,并结合基因工程,写出其生产过程:

(1)构建转入人胰岛素基因的工程菌。

①提取目的基因:用胰岛素基因探针从人的胰岛细胞中获取       ,再用    法制备人的胰岛细胞目的基因。

②目的基因与运载体结合:从大肠杆菌的细胞中提取    ,并用    酶切割质粒,使其露出        。用同一种酶切割目的基因使其产生相同的        ,再将目的基因插人质粒切口处,加入适量的        酶,这样就形成了一个                的重组DNA。

③将目的基因导人受体细胞:将大肠杆菌用      处理,以增大        的通透性,让重组DNA进人大肠杆菌体内。

④目的基因的检测和表达:在用一定的方法检测出目的基因已导人大肠杆菌细胞内,并       后,再对该种大肠杆菌扩大培养。

(2)发酵生产。如图为发酵罐,回答:(括号中填数字如[1])

①配制适合大肠杆菌的培养基,调整     ,然后对培养基进行       处理并装入发酵罐,将上述大肠杆菌接种于发酵罐发酵

②若经检测若发现放料口排出的旧培养基中微生物细胞形态多样,甚至出现畸形,则此时微生物的生长处于   期,加料口[  ]添加新培养基的速度应该适当   ,并从[  ]以适当速度通入   

③若该装置阶段发酵的目的是为扩大培养生产酵母菌菌种,则应尽可能延长     期,采取的主要措施为:加料口放料的速度都      ,通人的无菌空气成分中应      ,搅拌的速度适当       

④影响发酵过程中温度变化的因素是        

⑤发酵过程中pH变化的原因是           

⑥搅拌器搅拌的作用是              

(3)发酵完毕后,从培养基中              胰岛素,经过一定的加工成为药用胰岛素,经      合格后,可投入使用。

[解析]本题考查对基因工程、细胞工程、发酵工程和酶工程相互关系的理解,并带有一点实验设计“味道”,因而突出了创新思维能力的考查力度。解题思路是:先运用基因工程构建转入人胰岛素基因的工程菌,再利用该工程菌,运用发酵工程生产人胰岛素,然后利用类似酶工程中分离提纯技术得到胰岛素产品。

[答案](1)①人胰岛素基因mRNA;反转录  ②质粒  限制性内切  黏性末端  黏性末端  DNA连接  人的胰岛素基因  大肠杆菌质粒  ③氯化钙  细胞壁  ④能表达  (2) ①pH;灭菌②衰退;[1][4];无菌空气③对数;加快;有充足的氧;加快④微生物代谢,机械搅拌、罐壁散热、水分蒸发、冷却水循环等⑤营养物质的消耗、代谢产物的积累⑥增加溶氧;使菌种与培养基充分接触提高原料利用率  (3)提取、提纯、检验

 0  210863  210871  210877  210881  210887  210889  210893  210899  210901  210907  210913  210917  210919  210923  210929  210931  210937  210941  210943  210947  210949  210953  210955  210957  210958  210959  210961  210962  210963  210965  210967  210971  210973  210977  210979  210983  210989  210991  210997  211001  211003  211007  211013  211019  211021  211027  211031  211033  211039  211043  211049  211057  447348 

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