2.方法步骤

A.DNA的粗提取

(1)准备材料:将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24小时。

(2)取材:称取30 g菜花,去梗取花,切碎。

(3)研磨:将碎菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min。

(4)过滤:在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1000 r/min 的旋转频率,离心2~5 min;取上清液放入烧杯中)。在4℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液。

(5)加冷酒精:将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的酒精溶液中,并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀3~5 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。

B.DNA的鉴定

(1)配制二苯胺试剂:取0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混匀。

(2)鉴定:取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100℃)加热10 min。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。

结课:这节课咱们验证了细胞是由化合物按照一定的方式组成的这一结论。从知识结构角度来说,一要加深对生物的物质性理解;二要掌握一般的物质提取方法;三要注意不同的化学物质要用不同的原理鉴定。从实验过程角度来说,要理解各种溶液和试剂的作用和目的。

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