4、实验创新：在本实验中在圆形滤纸中央点上叶绿体色素的

提取液进行层析，会得到近似同心的四个色素环，由内到外依次

是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。

3、结果分析：①从色素带的宽度可知色素含量的多少依次为：

叶绿素a ＞叶绿素b ＞叶黄素＞胡萝卜素； ②从色素带的位置可

知色素在层析夜中溶解度大小依次是：胡萝卜素＞叶黄素＞叶绿素

a ＞叶绿素 b ； ③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a

与叶绿素b ，距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。

2、步骤：

1、原理：(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。(2)不同的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素分离。

(二)植物细胞质壁分离和复原

1．原理：成熟(有明显液泡)的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统，通过渗透作用的方式吸水或失水。

2．应用：(1)可以用于测定细胞液的浓度　 (2)可以用于判断细胞的死活

3．注意问题：

(1)细胞发生质壁分离后，细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0．3mg/mL蔗糖溶液。

(2)动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。

1．选材：选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。其细胞液为紫色，在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分，观察到的质壁分离和复原效果明显。

　 另外，取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。

2．试剂：选用0．3g/ml 蔗糖糖溶液。浓度过高，细胞质壁分离速度虽然很快，但不久就会将细胞杀死，细胞不能进行质壁分离复原；若浓度过低，则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。

另外，8% 食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油……也可使用，但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。

3．时间的控制：做好质壁分离的实验后，不久就要做质壁分离复原实验。避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中，细胞过度失水而导致死亡。从而观察不到质壁分离复原的现象。

(一)质壁分离

原理：①细胞液浓度>细胞外溶液浓度时，细胞吸水；细胞液浓度<细胞外溶液浓度时，细胞失水

②细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。

1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡

2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡)，质量浓度0．3g/mL的蔗糖溶液，清水等。

3、步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一側滴蔗糖溶液,另一側用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一側滴清水, 另一側用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)

4、结论:　 细胞外溶液浓度 ＞ 细胞内溶液浓度，细胞失水　　　 质壁分离

细胞外溶液浓度 ＜ 细胞内溶液浓度，细胞吸水　　　 质壁分离复原

2、步骤：

　 (1)探究温度对酶活性的影响

温度对酶活性的影响

在温度对酶活性的影响的实验中，三支试管的条件，除温度外均相同。3号试管处在60℃的温度条件下，酶活性最大，试管中的淀粉被分解，滴入碘液后不会变蓝。2号试管的温度条件是100℃， 这样高温度条件下，淀粉酶已失去活性，1号试管的温度条件是O℃，低温抑制淀粉酶的活性。所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解，滴上碘液后都会变蓝，此实验可以证明；酶的催化作用需要适宜的温度条件，温度过高和过低都将影响酶的活性。

　 (2)探究pH对酶活性的影响

实验1 过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下，可以分解成水和氧气，可以放入带火星的木条，看能否复燃来检测是否有氧气产生。

2号试管内加入了盐酸，溶液的pH较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH较高，在过低或过高pH环境中，过氧化氢酶失去活性，不能使过氧化氢分解，没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱，溶液近似中性，过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气，使木条复燃。

实验2

原理：淀粉在淀粉酶的作用下，被分解成麦芽糖，麦芽糖能与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色沉淀

步骤	项目	试管1	试管2	试管3
1	加入可溶性淀粉溶液	2mL	2mL	2mL
2	加入蒸馏水	1mL	-	-
3	加入盐酸溶液	-	1mL	-
4	加入NaOH溶液	-	-	1mL
5	加入新配置的淀粉酶溶液	2滴	2滴	2滴
6	60℃水浴	5min	5min	5min
7	加入斐林试剂	2mL	2mL	2mL
8	50℃－60℃水浴	2min	2min	2min
9	观察结果	有砖红色沉淀	无	无

实验现象记录如下：1号试管有砖红色沉淀生成，2号试管无砖红色沉淀生成，3号试管无砖红色沉淀生成。

　　 2号试管内加入了盐酸，溶液的pH较低，3号试管内加入了氢氧化钠，溶液的pH较高，在这样的pH环境中，淀粉酶失去活性，不能使淀粉分解，所以试管中加人斐林试剂后并无砖红色沉淀生成。1号试管内没有加入酸或碱，溶液近似中性，这样的pH适于淀粉酶发挥催化作用，所以淀粉被分解并与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀。以上实验可以证明，酶的催化作用需要适宜的pH，pH偏低或偏高都能影响酶的活性

原理：淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖，麦芽糖遇碘后，不形成蓝色的复合物。

1、材料：新配置的淀粉酶溶液，新鲜肝脏研磨液，可溶性淀粉溶液，过氧化氢溶液等。

2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。

　　　　 用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。

步骤	操作方法	目的与作用
(1)取材	①新鲜的藓类的叶 ②菠菜叶下表皮略带一些叶肉	①藓类叶为单层细胞 ②下表皮容易撕取,要略带些叶肉
(2)制片	注意叶片不能太干了，保持有水的状态	以免影响细胞活性
(3)观察	叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积(长轴)转向光源，在强光下以最小面积(短轴)转向光源。
(1)取材	漱口，口腔内侧壁上轻刮几下
(2)染色	将口腔细胞放在健那绿液滴上
(3)观察	盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色
问题	1、为什么不用植物细胞来观察线粒体？ 植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。 2、如果观察发现染色不足，如何补色？ 在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸

1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片