【题目】草鱼病毒性出血病是由草鱼呼吸孤病毒(GCRV)引起的,目前尚未找到防治药物.如图是通过基因工程方法将PV7双基因与某质粒连接,并通过草鱼攻毒实验检测免疫保护效果的过程示意图.图中P10和PH为启动子,箭头表示转录方向.PV71和PV72为GCRV外壳蛋白基因(DNA片段).请回答下列问题:

草鱼病毒性出血病核酸疫苗实验鱼的死亡率和免疫保护率记录表

组别

疫苗注射量

实验鱼数

死亡鱼数

死亡率

免疫保护率

1

10μg

20尾

0尾

0

100%

2

30μg

20尾

0尾

0

100%

3

60μg

20尾

1尾

5%

95%

空载体

30μg

20尾

6尾

30%

70%

对照

0

20尾

20尾

100%

0

(1)制备草鱼病毒性出血病核酸疫苗,获取大量PV7双基因时可采用PCR技术进行扩增,该技术除需要原料、模板、________外,还必须用________酶.PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、复性和延伸三个阶段,其中复性降低温度的作是______

(2)使用不同的限制酶切割PV71和PV72基因,是为了防止_____________,用不同限制酶先后两次切割质粒,是为了防止_____________,有利于提高核酸疫苗构建的成功率.

(3)攻毒实验检测是指将不同浓度的核酸疫苗导入草鱼体内,通过转录和翻译产生草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白,使草鱼生成抗体和记忆细胞,同时给草鱼注入相同浓度的GCRV,我,统计草鱼免疫保护率,实验结果说明_______________ .导入空载体(普通质粒)的草鱼免疫保护率达到70%,但草鱼体内并未检测到抗体水平的明显增加,可能的原因是________________________.核酸疫苗注射后,科学家发现PV7双基因在启动子的驱动下持续表达,至第49天核酸疫苗仍没有被降解,仍能检测到PV7双基因的转录.综上所述,与常规基因工程生产的蛋白质疫苗相比,核酸疫苗所具备的优点有_____

 0  162952  162960  162966  162970  162976  162978  162982  162988  162990  162996  163002  163006  163008  163012  163018  163020  163026  163030  163032  163036  163038  163042  163044  163046  163047  163048  163050  163051  163052  163054  163056  163060  163062  163066  163068  163072  163078  163080  163086  163090  163092  163096  163102  163108  163110  163116  163120  163122  163128  163132  163138  163146  170175 

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