18.转基因重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原(HbsAg)亚单位疫苗,它采用转基因的方法将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建,转入啤酒酵母菌中,通过培养这种重组酵母菌来表达乙肝表面抗原亚单位.转基因酵母的产生过程如图1所示.质粒上有SnaBⅠ、AvrⅡ、SacⅠ、BglⅡ四种限制性酶切割位点,且酶切序列如表所示.请回答:
限制酶识别序列及酶切位点
SnaBⅠ
AvrⅡ
SacⅠ
BglⅡ
(1)由于HBsAg基因序列已知,因此过程①可通过PCR技术得到大量HBsAg基因,此外也可将其连接在 
质粒上,通过大肠杆菌培养扩增.
(2)构建含抗病基因的重组质粒时,应选用限制性核酸内切酶B、D(不定项选择)(A.SnaBⅠB.AvrⅡC.SacⅠD.BglⅡ)对含HBsAg基因的DNA和质粒进行切割,切割一个含HBsAg基因的DNA分子需要消耗
4个水分子.
(3)不同的微生物通常需要不同的培养基进行培养,已知酿酒酵母培养基配方为:酵母提取物10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,定容至1L,加入1.5%琼脂粉制成固体培养基.则其灭菌条件应为A.
A.高压蒸汽灭菌法,且温度为121℃,压力为1kg/cm2,灭菌15分钟
B.高压蒸汽灭菌法,且温度为95℃,压力为500g/cm2,灭菌30分钟
C.将配好的培养基放在超净台中,打开紫外灯和过滤风,灭菌30分钟
D.在超净台中,打开过滤风,在酒精灯火焰旁用G6玻璃砂漏斗过滤灭菌
(4)将重组质粒导入酵母菌后,可用涂布分离法接种到固体培养基上.某同学在接种后得到如图2所示的菌落分布,推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均勻.若欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入HBsAg基因的酵母菌,则应使重组质粒中含有抗卡那霉素基因作为标记基因,这种培养基属于选择培养基.
(5)已知酵母菌的最适培养温度是28℃,在培养时可将培养皿倒置并放入恒温培养箱进行培养.若不倒置培养将导致无法形成单菌落.
 0  127060  127068  127074  127078  127084  127086  127090  127096  127098  127104  127110  127114  127116  127120  127126  127128  127134  127138  127140  127144  127146  127150  127152  127154  127155  127156  127158  127159  127160  127162  127164  127168  127170  127174  127176  127180  127186  127188  127194  127198  127200  127204  127210  127216  127218  127224  127228  127230  127236  127240  127246  127254  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网