19.科研人员拟将已知的花色基因(目的基因)转人矮牵牛的核基因组中,培育新花色的矮牵牛.请回答:
(1)为了获得大量的目的基因,将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA,再与经A(A.氯化钙、B.氯化钠、C.蔗糖、D.葡萄糖)处理的大肠杆菌液混合,使重组DNA进入大肠杆菌.
(2)从扩大培养的大肠杆菌中提取含有目的基因的DNA,用限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的 DNA和农杆菌的Ti质粒,然后用DNA连接酶连接,形成重组DNA并导入农杆菌.
(3)取田间矮牵牛的幼嫩叶片,经自来水冲洗,先用70%酒精浸泡,再用5%次氯酸钠浸泡,最后用无菌水清洗,为转基因的受体材料消毒.
(4)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片,在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后,取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素,下同)上,使叶小叶先脱分化形成愈伤组织.再将其转移至另一培养基诱导形成芽,芽切割后转移至B(A.LB培养基    B.MS培养基+适宜浓度NAA  C.MS培养基+适宜浓度BA   D.NAA/BA小于1的MS培养基)上生根,形成完整植株.
(5)取出试管苗,在适宜的光照、温度和80%以上的湿度等条件下进行炼苗.提取叶片组织的DNA,采用PCR技术扩增目的基因,鉴定目的基因是否成功导入.
(6)为判断本研究是否达到预期目的,可比较转基因植株和非转基因植株的花色性状.
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