题目内容

19．科研人员拟将已知的花色基因（目的基因）转人矮牵牛的核基因组中，培育新花色的矮牵牛．请回答：
（1）为了获得大量的目的基因，将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA，再与经A（A．氯化钙、B．氯化钠、C．蔗糖、D．葡萄糖）处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA进入大肠杆菌．
（2）从扩大培养的大肠杆菌中提取含有目的基因的DNA，用限制性核酸内切酶分别切割含目的基因的 DNA和农杆菌的Ti质粒，然后用DNA连接酶连接，形成重组DNA并导入农杆菌．
（3）取田间矮牵牛的幼嫩叶片，经自来水冲洗，先用70%酒精浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用无菌水清洗，为转基因的受体材料消毒．
（4）将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基（含蔗糖、琼脂和抗生素，下同）上，使叶小叶先脱分化形成愈伤组织．再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至B（A．LB培养基    B．MS培养基+适宜浓度NAA  C．MS培养基+适宜浓度BA   D．NAA/BA小于1的MS培养基）上生根，形成完整植株．
（5）取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的湿度等条件下进行炼苗．提取叶片组织的DNA，采用PCR技术扩增目的基因，鉴定目的基因是否成功导入．
（6）为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因植株和非转基因植株的花色性状．

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法，即需要利用钙离子处理使受体细胞变成感受态细胞．因此，为了获得大量的目的基因，将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA，再与经氯化钙处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA进入大肠杆菌．
（2）基因工程的工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（3）取田间矮牵牛的幼嫩叶片，经自来水冲洗，先用70%酒精浸泡，再用5%次氯酸钠浸泡，最后用无菌水清洗，作为转基因的受体材料．
（4）将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基（含蔗糖、琼脂和抗生素，下同）上，使叶小叶先脱分化形成愈伤组织．再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至MS培养基+适宜浓度NAA上生根，形成完整植株．
（5）取出试管苗，在适宜的光照、温度和80%以上的湿度等条件下进行炼苗．提取叶片组织的DN A，采用PCR技术扩增目的基因，鉴定目的基因是否成功导入．
（6）为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因植株和非转基因植株的花色性状．
故答案为：
（1）A    
（2）限制性核酸内切酶    DNA连接酶
（3）酒精    无菌水  
（4）愈伤组织    B   
（5）湿度   扩增     
（6）花色

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及意义，掌握基因工程采用的工具及具体操作步骤，能结合所学的知识准确分析各题．

练习册系列答案
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12．利用酵母菌酿制啤酒，需要先通气，后密封，下列说法不正确的是（　　）
A．酵母菌是兼性厌氧型微生物
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D．密封的时间越长，产生的酒精越多
10．植物扦插繁殖时，需要对插枝进行去除成熟叶片、保留芽和幼叶等的处理，这样可以促进插枝成活．其原因是（　　）
A．芽和幼叶生长迅速．容易成活B．芽和幼叶储存较多的营养物质
C．芽和幼叶能产生生长素，促进生根D．去除成熟叶片不能降低蒸腾作用
7．洋葱根尖细胞分裂过程中，当染色体数：染色单体数：核DNA分子数=1：0：1时，该细胞中不正确的是（　　）
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B．从细胞两极发出纺锤丝形成梭形纺锤体
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14．如图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案，据图回答：
（1）该方案能达到预期效果吗？不能原因是没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞．
（2）图中②为动物细胞融合过程，常用灭活的病毒、聚乙二醇作为诱导剂，该细胞具有的特点是迅速大量繁殖和产生专一性抗体．
（3）破伤风杆菌的抗体最终可以从细胞培养液和小鼠腹水中提取．
（4）单克隆抗体比一般的血清抗体的优点是特异性强，灵敏度高，可大量制备．
4．下列有关癌症的叙述，不正确的是（　　）
A．癌细胞是由于人体内正常细胞的原癌基因被致癌因子激活所产生的
B．由于癌细胞易分解和转移，所以手术切除癌肿瘤的患者仍有复发的可能
C．对手术治疗后的癌症患者进行放疗和化疗是为了杀死患者体内残余的癌细胞
D．从媒体广告上看，有的治癌药物的药效可达95%以上，因而癌症的治疗并不困难
11．某校研究性学习小组进行人类某些遗传病的调查，并绘制出如图，图中甲病（基因用A、a表示）、乙病（基因用B、b表示）是两种单基因遗传病，请据图回答下列问题．
（1）根据如图分析，甲病的遗传方式是常染色体显性遗传；
（2）若Ⅱ-4不携带乙病致病基因，则Ⅲ-3携带乙病致病基因的概率是1，Ⅱ-2的基因型为XBXB或XBXb；
（3）若Ⅱ-4携带乙病致病基因，则Ⅱ-2的基因型为BB或Bb．

（2011•江苏）关于“噬细体侵染细菌的实验”的叙述，正确的是（ ）

A．分别用含有放射性同位素35S和放射性同位素32P的培养基培养噬菌体

B．分别用35S和32P标记的噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌，进行长时间的保温培养

C．用35S标记噬菌体的侵染实验中，沉淀物存在少量放射性可能是搅拌不充分所致

D．32P、35S标记的噬菌体侵染实验分别说明DNA是遗传物质、蛋白质不是遗传物质

（2015秋•侯马市校级期中）表分别是生物体及人体组织、器官的含水量．对表中数据分析可得出的正确结论是（ ）

生物体的含水量：

生物

水母

鱼类

蛙

哺乳动物

藻类

高等植物

含水量（%）

97

80～85

78

65

90

60～80

人体组织、器官的含水量：

组织器官

牙齿

骨骼

骨骼肌

心脏

血液

脑

含水量（%）

10

22

76

79

83

84

①构成生物体的成分中水的含量最多

②生物体的含水量与生物体的生活环境密切相关

③代谢旺盛的组织器官含水较多

④组织器官的形态结构差异与水的存在形式相关．

A．①②③④ B．②③ C．①② D．①③

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