13.科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长.质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点,图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),其中①-④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞.请据图作答:

(1)在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割.该酶的特点识别特定的DNA序列并在特定位点切割.为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用限制酶PstI、SamI对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割,然后用DNA连接酶 将它们连接起来.
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长,要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有抗氨苄青霉素基因(ampr)作为标记基因.
(3)研究人员通常采用农杆菌转化(或基因枪法等)法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.通常采用抗原-抗体杂交技术,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质.
(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株.图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的脱分化、再分化过程.在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入植物激素.同时,在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌.
(5)与植物组织培养的培养基相比,用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外,通常还要添加动物血清.
 0  119890  119898  119904  119908  119914  119916  119920  119926  119928  119934  119940  119944  119946  119950  119956  119958  119964  119968  119970  119974  119976  119980  119982  119984  119985  119986  119988  119989  119990  119992  119994  119998  120000  120004  120006  120010  120016  120018  120024  120028  120030  120034  120040  120046  120048  120054  120058  120060  120066  120070  120076  120084  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网