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11.如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究,请分析回答下列问题.

(1)a过程表示基因工程,则其核心步骤是致癌基因表达载体的构建,该过程所使用的工具酶有限制酶、DNA连接酶.
(2)将基因表达载体导入ES细胞的方法是显微注射法,为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA,可采用DNA分子杂交技术.
(3)b过程可以获得更多的ES细胞,其采用的技术属于细胞工程中的动物细胞培养技术.若要从早期胚胎中获得更多ES细胞,则可将早期胚胎培养至囊胚(时)期.
(4)完成c、d过程的胚胎工程技术分别是早期胚胎培养(技术)、胚胎移植(技术).若要培养试管动物,除以上两种技术外,还需要运用体外受精技术.
(5)用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物抗肝癌细胞抗体,该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞.

分析 分析图解:a表示将致癌基因导入小鼠的胚胎干细胞,b表示胚胎干细胞的体外培养,c表示利用早期胚胎培养技术获得早期胚胎,d表示胚胎移植技术,最终获得转基因小鼠.

解答 解:(1)a过程表示基因工程,基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建,该过程所使用的工具酶有限制酶、DNA连接酶.
(2)将基因表达载体导入动物细胞(ES细胞)的方法是显微注射法,为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA,可采用DNA分子杂交技术.
(3)b过程胚胎干细胞的体外培养,可以获得更多的ES细胞,其采用的技术属于细胞工程中的动物细胞培养技术.若要从早期胚胎中获得更多ES细胞,则可将早期胚胎培养至囊胚期.
(4)由分析可知,完成c、d过程的胚胎工程技术分别是早期胚胎培养(技术)、胚胎移植(技术).若要培养试管动物,除以上两种技术外,还需要运用体外受精技术.
(5)用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物抗肝癌细胞抗体,该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞.
故答案为:
(1)致癌基因表达载体的构建      限制酶、DNA连接酶
(2)显微注射法       DNA分子杂交
(3)动物细胞培养     囊胚
(4)早期胚胎培养(技术)    胚胎移植(技术)      体外受精
(5)抗肝癌细胞抗体

点评 本题综合考查了基因工程、细胞工程、胚胎工程等方面的知识,要求考生能够识记胚胎干细胞的特点和来源;识记动物细胞培养的培养液成分及作用;识记目的基因导入受体细胞的方法,再结合所学知识准确答题.

练习册系列答案
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13.科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长.质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点,图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),其中①-④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞.请据图作答:

(1)在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割.该酶的特点识别特定的DNA序列并在特定位点切割.为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用限制酶PstI、SamI对含鱼抗冻蛋白基因的DNA、质粒进行切割,然后用DNA连接酶 将它们连接起来.
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长,要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有抗氨苄青霉素基因(ampr)作为标记基因.
(3)研究人员通常采用农杆菌转化(或基因枪法等)法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.通常采用抗原-抗体杂交技术,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质.
(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株.图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的脱分化、再分化过程.在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入植物激素.同时,在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证无菌.
(5)与植物组织培养的培养基相比,用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外,通常还要添加动物血清.

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