16.白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂.由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示.
(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫.已知该基因的全部序列,科研人员通过人工合成(或“化学合成”)法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段.据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是NcoI、BamHI和DNA连接酶.
(2)重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用Xba I 酶处理,得到酶切片段.重组质粒1 的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基团脱离,目的是防止重组质粒1酶切片段自身连接(或“相互连接”).将未用去磷酸化酶处理的Bar 基因与重组质粒1 连接,获得重组质粒2.获得的重组质粒2的是下图中的C.
(3)将重组质粒2与经Ca2+处理过的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒 2在白僵菌细胞内被修复.一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选,获得含有Bar 基因的重组白僵菌.
(4)提取上述重组白僵菌全部mRNA,加入逆转录酶,获得cDNA.在获得的产物中加入毒蛋白基因引物进行PCR反应,用以检测毒蛋白基因是否完成了转录.
(5)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的死亡害虫数,以判断重组白僵菌的杀虫效果.
14.图1表示将A植物放在不同浓度CO2环境条件下,A植物光合效率受光照影响的变化曲线,图2代表植物的一个叶肉细胞及其相关生理过程示意图,请分析完成下列问题:
(1)图1中,在e点时,叶绿体中ADP的移动方向是从叶绿体基质移向类囊体薄膜.线粒体中CO2扩散到邻近的叶绿体中被利用至少要经过8层磷脂分子层.
(2)图1中e点与f点相比较,e点时叶肉细胞中C3的含量高(填“高”“低”“基本一致”).
(3)图2中,p点不可以(填“可以”或“不可以”)代表葡萄糖,因为葡萄糖的分解发生在细胞质基质.
(4)在图2中,假如C18O2作为某一生理作用的原料,则在较强的光照条件下,图中含有18O的呼吸作用产物的去向是图3中的q途径(用图中字母表示);此时,在基粒上发生的能量转变是光能转变为ATP中活跃的化学能,光合作用的总反应式是CO2+H2O$→_{叶绿体}^{光能}$(CH2O)+O2
(5)从生长状况相同的棉花叶片上剪出大小、部位相同的若干圆叶片、抽取叶片细胞内的气体,平均分成若干份,然后,置于不同浓度的NaHCO3溶液中,给予相同的一定强度光照,测量圆叶片上浮至液面所需时间,将记录结果绘成曲线如图3,请据此回答.
①该实验的目的是:探究CO2浓度对光合作用强度的影响.
②从图解分析,c点以后曲线上行,其最可能的原因应该是NaHCO3浓度太大,细胞失水而影响代谢.
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