白僵菌可感染农业害虫.常作为防治害虫的菌剂．由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱.科研人员对其进行基因工程改造.流程如图所示．(1)苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白.能有效杀死害虫．已知该基因的全部序列.科研人员通过人工合成法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段．据图分析.将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

16．白僵菌可感染农业害虫，常作为防治害虫的菌剂．由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱，科研人员对其进行基因工程改造，流程如图所示．

（1）苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白，能有效杀死害虫．已知该基因的全部序列，科研人员通过人工合成（或“化学合成”）法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段．据图分析，将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶是NcoI、BamHI和DNA连接酶．
（2）重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）各自用Xba I 酶处理，得到酶切片段．重组质粒1 的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，目的是防止重组质粒1酶切片段自身连接（或“相互连接”）．将未用去磷酸化酶处理的Bar 基因与重组质粒1 连接，获得重组质粒2．获得的重组质粒2的是下图中的C．

（3）将重组质粒2与经Ca²⁺处理过的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒 2在白僵菌细胞内被修复．一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选，获得含有Bar 基因的重组白僵菌．
（4）提取上述重组白僵菌全部mRNA，加入逆转录酶，获得cDNA．在获得的产物中加入毒蛋白基因引物进行PCR反应，用以检测毒蛋白基因是否完成了转录．
（5）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的死亡害虫数，以判断重组白僵菌的杀虫效果．

分析分析图解：图中首先利用NcoI、BamHI两种限制酶切割目的基因和质粒，然后再用DNA连接酶形成重组质粒，利用两种限制酶可以防止目的基因和质粒自身连接；然后再利用XbaI 酶分别切割重组质粒1和Bar基因，再构建重组质粒2．

解答解：（1）根据题意可知，已知该基因的全部序列，因此科研人员应通过人工合成（或“化学合成”）法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段．据图分析，将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒l的过程需要用到的工具酶是NcoI、BamHI和DNA连接酶．
（2）利用同一种限制酶切割质粒和目的基因产生的黏性末端相同，这样容易导致质粒和目的基因自身环化．因此重组质粒1和Bar基因各自用XbaI酶处理，得到酶切片段．重组质粒l的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使端游离的磷酸基团脱离，目的是防止重组质粒1酶切片段自身连接（或“相互连接”）．如果Bar基因未用去磷酸化酶处理，则形成的黏性末端两端都存在游离的磷酸集团；而重组质粒1利用了去磷酸化酶处理，两端没有游离的磷酸集团，因此将两者连接，获得重组质粒2，即两端都不能完全连接，如图中的C．
（3）将重组质粒2与用钙离子处理处于感受态的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复．一段时间后用含有草丁膦的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌．
（4）提取上述重组白僵菌全部mRNA，加入逆转录酶，获得cDNA．由于mRNA是通过转录而来的，合成的cDNA也是特定的DNA，因此再加入毒蛋白基因引物进行PCR反应，用以检测毒蛋白基因是否完成了转录．
（5）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的死亡害虫数，以判断重组白僵菌的杀虫效果．
故答案为：
（1）人工合成（或“化学合成”）     Nco I、BamH I
（2）重组质粒1酶切片段自身连接（或“相互连接”）    C
（3）Ca²⁺  草丁膦
（4）逆转录    转录
（5）死亡害虫数

点评本题考查了基因工程的有关知识，具有一定的综合性和难度，要求考生能够掌握基因表达载体构建的过程；识记基因工程的工具酶，并能够根据图示信息进行解题．

练习册系列答案

	A．	内质网、高尔基体、胰岛素		B．	内质网、线粒体、胰高血糖素
	C．	高尔基体、中心体、胰蛋白酶		D．	高尔基体、线粒体、呼吸酶

7．如图是某同学制作DNA双螺旋结构模型时，搭建的一个脱氧核苷酸对．其中正确的是（　　）

4．鉴别一个正在进行有丝分裂的细胞是植物细胞还是动物细胞，最可靠的方法是检查它的（　　）

	A．	染色体着丝点分裂		B．	DNA自我复制
	C．	细胞质分成两部分的方式		D．	是否出现星射线

11．下列有关蛋白质的说法正确的是（　　）

	A．	血红蛋白的空间结构呈纤维状
	B．	蛋白质经高温蒸煮可产生丰富的氨基酸
	C．	氨基酸结构中的R基均是链状而非环状结构
	D．	鸟类的羽毛和人的指甲主要是由同一种蛋白质组成

1．现一种蜣螂（俗称屎壳郎）提高了“生活品味”，不仅吃粪便，还取食包括蜈蚣在内的千足虫．与普通蜣螂相比其部分结构也发生变化：头部较窄而长，便于进食千足虫内脏，后腿较卷曲，便于捕猎千足虫．下列有关叙述错误的是（　　）

	A．	该蜣螂既是消费者又是分解者
	B．	与普通蜣螂相比，该蜣螂种群的某些基因频率发生了改变
	C．	头部和后腿结构发生变化是环境改变的结果
	D．	该蜣螂与普通蜣螂之间可能产生了生殖隔离

8．在浮游植物→小鱼→海豹→虎鲸这条食物链中鲸增加1kg体重，至少消耗浮游植物的量为（　　）

4．

如图为白杨树的主干上端．A、B、C、D分别为其上生长的侧芽．请分析：
（1）这些侧芽发育成枝的顺序是DCBA．
（2）生长素主要由顶芽处产生，以主动运输的方式积累在侧芽处．
（3）如剪去顶芽，A将发育成枝条，原因是破坏了顶端优势．此时B芽处生长素浓度最高．
（4）上述现象称为顶端优势它证明了生长素生理作用特征是低浓度促进生长，高浓度抑制生长．低浓度促进生长，高浓度抑制生长．

3．下列关于图示的说法错误的是（　　）

	A．	图一所示过程相当于图三的③过程，主要发生于细胞核中
	B．	若图一的①中A占23%，U占25%，则相应的双链DNA片段中A占24%
	C．	图二所示过程相当于图三的⑥过程，所需原料是氨基酸
	D．	正常情况下图三中在动植物细胞中可能发生的是②③④⑤⑥过程

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