环境中的污染物能使处于分裂期的细胞产生缺失着丝点的染色体片段，当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩在主核之外，形成了微核（如图中箭头所指）．蚕豆根尖微核测试被列为国家监测水质污染的规范方法之一．下面是某研究小组利用微核测试技术进行“校园内池塘水污染情况调查”的主要实验步骤．
①浸种催芽：将大小均匀的蚕豆种子，在250C等适宜条件下浸泡、催芽，待大部分根长至1-2cm左右，即可选作实验材料．
②采集池塘水样：从校园池塘的5个不同地段采集水样．
③待检测水样处理根尖及恢复培养：选取步骤①中根长度一致、生长良好的种子30粒，随机均分为6组，分别放入5个盛有待检测水样和1个盛有蒸馏水的培养皿中，液体量以浸没根尖为限．在25℃下处理24h后，取出种子，用蒸馏水漂洗三次，洗净后再置入铺有湿润滤纸的瓷盘中，25'C下再恢复培养24h．
④制作蚕豆根尖临时装片：切取各培养条件下获得的蚕豆根尖，用卡诺氏液固定细胞中的染色体后，按正常步骤制作根尖临时装片．
⑤观察统计实验结果．请回答有关问题：
（1）在进行池塘水样采集时，应注意，以保证水样的代表性．
（2）用检测水样处理后，需要在250C下恢复培养24h的目的是．
（3）制作蚕百根尖临时装片的主要步骤是（以文字和箭头表示），在低倍镜下观察到的根尖分生区细胞的特点是．
（4）微核的产生属于变异．选择间期细胞作为观察统计微核的原因是．

（五）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有个游离的磷酸基团．
（2）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是．
（3）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止．
（4）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，需加入酶．重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了．
（5）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测．
（6）若用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点．

回答下列有关遗传的问题：
果蝇的眼色由两对独立遗传的基因（A、a和B、b）控制，其中B、b仅位于X染色体上．A和B同时存在时果蝇表现为红眼，B存在而A不存在时为粉红眼，其余情况为白眼．
Ⅰ、一只纯合粉红眼雌果蝇与一只白眼雄果蝇杂交，F₁代全为红眼．
（1）亲代雌果蝇的基因型为，F₁代雌果蝇能产生种基因型的配子．
（2）将F₁代雌雄果蝇随机交配，使得F₂代粉红眼果蝇中雌雄比例为，在F₂代红眼雌果蝇中杂合子占的比例为．
II、果蝇体内另有一对基因T、t，与基因A、a不在同一对同源染色体上．当t基因纯合时对雄果蝇无影响，但会使雌果蝇性反转成不育的雄果蝇．让一只纯合红眼雌果蝇（TTAAX^BX^B）与一只白眼雄果蝇（ttAAX^bY）杂交，所得F₁代的雌雄果蝇随机交配．（F₂代雌雄比例为3：5，无粉红眼出现．）
（3）F₁代的雌果蝇的基因型和表现型是．
（4）F₂代雄果蝇中共有种基因型，其中不含Y染色体的个体所占比例为．
（5）用带荧光标记的B、b基因共有的特有的序列作探针，与F₂代雄果蝇的细胞装片中各细胞内染色体上B、b基因杂交，通过观察荧光点的个数可以确定细胞中B、b基因的数目，从而判断该果蝇是否可育．在一个处于有丝分裂后期的细胞中，若观察到个荧光点，则该雄果蝇可育；若观察到个荧光点，则该雄果蝇不育．

转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等．下图是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程．请据图回答：

（1）基因工程的核心步骤是．（填字母）此过程所需的工具酶是．
（2）构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有和．
（3）在培育能产生人胰岛素烟草的（填字母）过程中，需要植物组织培养技术．
（4）B过程中，常用处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入．
（5）如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用方法．

如图是患甲病（显性基因为A，隐性基因为a）和乙病（显性基因为B，隐性基因为b）两种遗传病的系谱图．据图回答下列问题．
（1）甲病的致病基因位于染色体上，为性遗传．
（2）据查Ⅱ₃不携带乙病致病基因，则乙病的致病基因位于染色体上，为性遗传．
（3）Ⅰ₁的基因型是，Ⅱ₇的基因型是．
（4）Ⅲ₁₀不携带致病基因的概率是．
（5）Ⅱ₃和Ⅱ₄再生一个女孩，该女孩既患甲病又患乙病的概率是．
（6）若Ⅲ₈和Ⅲ₁₁婚配，生出只患甲病女孩的概率是．

剪秋罗是广泛分布于我国东北、华北及长江流域的雌雄异株的多年生草本植物，有宽叶、窄叶两种类型．某科研所利用剪秋罗做了如下杂交实验研究其叶形的遗传．

杂交组合	亲代		子代
	雌	雄	雌	雄
第一组	宽叶	窄叶	无	全部宽叶
第二组	宽叶	窄叶	无	1 2 宽叶、 1 2 窄叶
第三组	宽叶	宽叶	全部宽叶	1 2 宽叶、 1 2 窄叶

请分析上表并回答下列问题（设B控制显性性状，b控制隐性性状）
（1）根据表中信息可以推断为显性性状．
（2）根据第3组杂交组合，可以推断控制剪秋罗叶形的基因型位于染色体上．
（3）上表中第1组和第2组的子代中无雌性个体，最可能的原因是；如果该推测成立，那么该科研所在对剪秋罗的自然种群的调查中将不会发现植株的存在．
（4）该科研所的研究人员通过实验调查，证实了上述推测的正确性，如果让第3组子代中的植株自由交配，产生的后代中宽叶植株与窄叶植株的比例为，窄叶基因的频率为．
（5）若偶尔发现一株理论上不存在的植株．该植物的出现可能是环境因素作用的结果，也可能是基因突变造成的．为进一步探究原因，科研人员利用该植株与宽叶雄性植株杂交，子代雄株全为窄叶，雌株全为宽叶，由此说明该植株的出现是由造成的．

如图1表示神经控制胰岛分泌激素的部分信号通路，神经兴奋可促使胰岛产生激素，图2表示在进食后若干小时内胰岛分泌激素的变化情况．

（1）图1中1所代表的结构是，2所代表的结构是．
（2）胰岛可分泌，这些激素可调节血糖平衡，图2中a、b两曲线分别代表两种激素不同的变化趋势，则其中a表示变化情况．
（3）图1结构2中传递神经信号的物质为．
（4）若给A处施加一个刺激，则A处Na⁺变化为，电位变化为?，此后，B、C、D各点能检测出同样的电位变化的是．
（5）若用蛋白酶处理这两个神经元细胞后，再次刺激A位点，可否检测到胰岛分泌相应的激素，为什么？
．

1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功．请据图回答：

（1）首先根据胰岛素的氨基酸序列，推测出原胰岛素mRNA上的碱基序列，再根据原则，用人工方法合成⑧DNA，通过这一过程获得了基因．
（2）图中①从大肠杆菌的细胞中提取，过程②须用酶切割．
（3）图中⑤表示的是的过程，图中③表示的是分子．
（4）④过程表示将分子导入细胞．
（5）若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域（0.2kb），操作过程见图2，那么所形成的重组质粒pZHZ2．
A．既能被E也能被F切开        B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开    D．能被F但不能被E切开．

（七）回答下列有关微生物和基因工程问题．
I大肠杆菌的培养基配方如下：

琼脂	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	伊红	美蓝	蒸馏水	pH
15g	10g	5g	5g	2g	0.4g	0.065g	1000mL	7.2

（1）从培养基配方可以确定大肠杆菌的营养类型是；从培养基功能可以确定其类型是培养基．
II．大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中．lacZ基因中如果没有插入外源基因，便可表达出β-半乳糖苷酶．当培养基中含有A物质时，A物质便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的A物质不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落．pUC118质粒还携带了氨苄青霉素抗性基因．如图是利用lacZ基因筛选重组质粒示意图．
（2）细菌结构中质粒被选为基因运载体的理由是（可多选）．
A．能复制    B．有限制酶切点   C．具有标记基因D．它是环状DNA
（3）图中获取人体基因时所用到的酶是，这类酶的专一性很强，其作用特点是；试管Ⅰ中必需加入的酶是．
（4）作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，原因是．
（5）图中的培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．
（6）将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．
②．

回答下列有关微生物和生物工程的问题．
基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程．经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质．细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因--氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列．
如图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①-⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题．

（1）写出下列字母和编号的名称：A：； D：；II：；
（2）将A和B形成D所需的酶是．过程⑤表示．
（3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有特性．然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养．根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落（填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是．
（4）上述培养基从功能上属于培养基．配制培养基时，在各成分都溶化后分装前，要进行的依次是和，培养基配制后采用高压蒸汽灭菌的原因是．