Question

20．微生物实验探究
天然果胶是细胞壁的一种组成成分，能使植物细胞黏连、紧密结合，遇水呈胶状固体样物．果胶酶是果胶水解酶，能使果胶分解为溶于水的小分子有机物，广泛用于水果加工．一些微生物能产生果胶酶；刚果红染料与果胶加水可以结合成红色胶状固体．
为分离、获取高产果胶酶菌种，科研人员进行了下列实验工作：
Ⅰ：配置培养基成分：

K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	X	琼脂	刚果红	Y
0.1g	0.5g	3g	0.01g	2g	15g	1g	加至1L

（1）X、Y所代表的成分依次是果胶和水；从功能上看，该培养基属于鉴别或选择培养基．
Ⅱ：制备培养基：培养基灭菌；然后在培养皿中制备培养平板．
（2）制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；
Ⅲ：采集菌种：
（3）科研人员一般在果园或果树下采集土壤；将采集的土壤放入无菌水中震荡，制成悬液．
Ⅳ：培养、筛选所需菌株
（4）为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行成倍稀释，制成系列浓度的悬液；
（5）写出接下来关键的实验操作步骤：
①接种：采用分区划线法，用接种针蘸取菌液，接种到培养基上
②培养：盖上培养皿盖，在适宜的环境中进行培养
③筛选：在不破坏菌落情况下，先用无菌水轻轻冲洗掉分离出的刚果红，然后选择果胶分解圈大、颜色浅或无色中的菌落．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

解答 解：（1）根据题干信息可知，实验需要分离、获取高产果胶酶菌种，因此培养基中需要加入果胶，并且需要加水定容至1L．从功能上看，该培养基属于鉴别或选择培养基．
（2）制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（3）果园或果树下的土壤中一定会存在该种微生物，因此科研人员一般在果园或果树下采集土壤．
（4）为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行成倍稀释，制成系列浓度的悬液．
（5）关键的实验操作步骤：
①接种：采用分区划线法，用接种针蘸取菌液，接种到培养基上
②培养：盖上培养皿盖，在适宜的环境中进行培养
③筛选：在不破坏菌落情况下，先用无菌水轻轻冲洗掉分离出的刚果红，然后选择果胶分解圈大、颜色浅或无色中的菌落．
故答案为：
（1）果胶和水    鉴别或选择
（2）高压蒸汽灭菌
（3）果园或果树下
（4）成倍稀释，制成系列浓度的悬液．
（5）接种：采用分区划线法，用接种针蘸取菌液，接种到培养基上    培养：盖上培养皿盖，在适宜的环境中进行培养 选择：果胶分解圈大、颜色浅或无色

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够根据题干信息确定培养基中的类型以及培养基的成分，掌握关键的实验操作步骤，再结合所学知识准确答题．