Question

13．金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等．某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如图．（注：培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）
请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供适合的营养和环境条件；另一方面需要确保无处不在的其它微生物无法混入，如培养皿和培养基都可以用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（2）据图，研究小组采用的是稀释涂布平板法分离和计数金黄色葡萄球菌．由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管灭菌，并编号1-4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是10⁴．
（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%-15%NaCL的肉汤中生长；本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为选择培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长
（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确．据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为3.6×10⁵．

Answer 1

分析 1、实验室常用的灭菌方法
①灼烧灭菌：微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，此外在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等；
③高压蒸汽灭菌：培养基采用该方法灭菌．
2、菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形状、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的颜色、（5）菌落的透明度．

解答 解：（1）微生物的实验室培养的关键是无菌操作，一方面需要保证目的微生物的营养和环境条件，另一方面需要确保不能使杂菌污染，培养皿和培养基都可以用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（2）据图分析，图中的平板中的菌落分布均匀，使用的是稀释涂布平板法接种．进行梯度稀释时的移液管需要进行灭菌处理．图中4号试管是稀释4次得到的，的稀释倍数是10⁴．
（3）金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，而其他微生物的盐的耐受力较差，所以实验中配制含10%氯化钠的培养基的目的是使其成为选择培养基．
（4）菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等．据图可知1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为（39+32+37）÷3×10³÷0.1=3.6×10⁵．
故答案为：
（1）营养    环境    高压蒸汽灭菌法
（2）稀释涂布平板    灭菌    10⁴   
（3）选择
（4）形状、大小、隆起程度和颜色     3.6×10⁵

点评 本题结合金黄色葡萄球菌的培养的实例，主要考查微生物的实验室培养及微生物的计数，意在强化学生对相关知识的理解与掌握．