Question

15．如下是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：
酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞
（1）在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态，一般是将干酵母放在蒸馏水中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时体积会增大．
（2）影响实验成败的关键步骤是配制海藻酸钠溶液．
（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少．
（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明海藻酸钠浓度偏高，制作失败．
（5）固定化细胞技术一般采用包埋法固定化，原因是细胞个体大，不易从包埋材料中漏出．
（6）该实验中CaCl₂溶液的作用是使胶体聚沉．
（7）将海藻酸钠与酵母细胞混合时要等海藻酸钠冷却至室温，再加入活化的酵母细胞．

Answer 1

分析 活化是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；
凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试．
刚形成的凝胶珠应在CaCl₂溶液中浸泡一段时间，以便Ca²⁺与Na⁺充分交换，形成的凝胶珠稳定．

解答 解：（1）酵母菌在缺水状态下处于休眠状态．活化加入水使得酵母菌恢复正常的生活状态，酵母细胞活化时体积会增大，则活化前应选择足够大的容器，以避免酵母菌溢出容器外．
（2）实验成败的关键是配制海藻酸钠溶液，形成凝胶珠．
（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠颜色过浅，所包埋的酵母细胞数目较少．
（4）观察形成的凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明固定化酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明海藻酸钠浓度偏高，制作失败．
（5）细胞个体大，难以吸附或结合，而且不易从包埋材料中漏出，则固定化细胞一般采用包埋法固定．
（6）CaCl₂溶液的作用是使胶体聚沉．
（7）由于高温会杀死酵母菌，所以将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入已活化的酵母细胞．
故答案为：
（1）正常的生活   蒸馏水  体积会增大     
（2）配制海藻酸钠溶液     
（3）少      
（4）海藻酸钠浓度偏高，制作失败       
（5）细胞个体大，不易从包埋材料中漏出      
（6）使胶体聚沉     
（7）冷却至室温

点评 本题考查酵母细胞的固定化，意在考查学生的识记和理解能力，解题的关键是实验的注意事项．