题目内容

18．人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源．纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养．
（1）请补充题干“梯度稀释”中的实验流程：梯度稀释；找不到合适的取样环境，可采取的办法是将富含纤维素的物质埋在土壤中．
（2）选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度；研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行培养，其中加入的纤维素为微生物的生长提供碳源．
（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用涂布平板法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养．
（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是180、200、160．则样品中微生物的数量为900个/mL．该统计结果低于 （低于、高于）实际值．

分析 从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．筛选纤维素分解菌需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，在培养基中加入刚果红染液，在其菌落周围会出现透明圈．

解答 解：（1）题干所给的实验流程缺少梯度稀释．如果找不到合适的取样环境，可采取的办法是将富含纤维素的物质埋在土壤中对目的微生物进行富集培养．
（2）选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，意在其他微生物的生长．纤维素是培养基中唯一的碳源．
（3）筛选获得的菌液稀释后用涂布平板的方法接种到鉴别培养基上，在纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈．
（4）计算微生物的数量应取三个平板的平均值，即（180+200+160）÷0.2=900个/mL．由于一个菌落可能是一个或多个细菌长成的，因此该结果会低于实际值．
故答案为：
（1）梯度稀释　 将富含纤维素的物质埋在土壤中　
（2）增加纤维素分解菌的浓度　碳源
（3）涂布平板　透明圈
（4）900  低于

点评 本题主要考查纤维素分解菌的筛选与分离，意在强化学生对目的微生物的筛选与分离，提高相应的实验技能．

练习册系列答案
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