44． 1) 实验原理：不同氨基酸在扩展剂的溶解度不同,所以在滤纸上的扩散速度不同,从而出现在滤纸的不同位置上。

2)实验步骤：

①　 6　 ② 用毛细管吸取氨基酸样品点在标记上 ,干燥后重复2-3次 。

③ 点样的一端在下,扩展剂的液面要低于点样线

①　　 用喷雾器向滤纸上均匀喷上0.1%的茚三酮溶液,待干燥后,观察并记录层析斑点的位置.

3)略

43.　 (1)乙，　 甲．　 (2)a处，　　 磷酸二酯键

(3) 绿色硬纸板(DNA分子甲)的碱基序列为：(2分)

　……ATAGCATGCTATCCATG|| AATTCGGCATAC……

　 ……TATCGTACGATAGGTACTTAA||GCCGTATG……

红色硬纸纸(DNA分子乙)的碱基序列为：

　 ……TCCTAG||AATTCTCGGTATG||AATTCCATAC……

　……AGGATCTTAA||GAGCCATACTTAA||GGTATG……

　 (4)受体菌　　 基因组　　　 部分基因

　 (5) ①目的基因：用酶2和4切割，质粒用酶1和2切割，由于1和4切出的是平末端，可以相连，因而目的基因可以与质粒重组。

②一个　 不能

③2个　 1个

42. (1)竞争　 ,　　　　 (2)C

(3)A．方法步骤：

第二步：在甲培养基上接种R细菌，培养一段时间后，除去R细菌，乙培养基上不接种R细菌，作为对照。

第三步：在这两个培养基上分别接种相同的其他细菌,在适宜且相同条件下，培养一段时间。

第四步：观察并记录甲,乙2组细菌的生长情况

B．结果结论：

预期结果: 甲培养基上细菌的生长受到抑制不能繁殖(或长势比乙差)；乙培养基上细菌能正常生长繁殖(或长势比甲好)。

结论:　 R细菌产生了不利于其他细菌生长和繁殖的物质。

41.(1)醋酸菌发酵产生醋酸 (酒精被氧化产生醋酸)　　 (2)果胶酶、蛋白酶

　　 (3)①海藻酸钠浓度太低，(或将海藻酸钠融化时未等冷却就将活化的酵母菌液倒入)导致固定的酵母菌数量太少

　　　 ②所用菌种产生酒精的酶活性偏低，导致酒精产量偏低或发酵时间延长。

　　 (4)①对照原则、单一变量原则(缺一不得分)

　 ②因为淀粉分子太大难以通过琼脂扩散与淀粉酶接触而导致反应无法进行

2.显色剂:0.1%水和茚三酮溶液

若该同学想证明混合液确实含有上述5种氨基酸，请利用题给条件设计试验：

1)实验原理：

A.除脯氨酸,羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外,所用a－氨基酸和一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。

B.在一定条件下,　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。

2)实验步骤：

①取层析滤纸一张,剪成20厘米长,14厘米宽的滤纸条,在纸的一端距边缘2-3厘米处用铅笔画一条直线,再此直线上每间隔2厘米作一记号,共需作　　　 处记号.

②　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

③将处理好的滤纸条卷成筒状用U形扣固定,放入加好了扩展剂的层析缸中，待扩展剂上升到一定阶段时取出滤纸,自然风干。本步骤的注意事项是:　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

④　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 .

3)请在下图中绘出滤纸条上的预期结果：(已知扩散速度为赖氨酸<脯氨酸<缬氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)

1.扩展剂:4份水饱和的正丁醇和1份醋酸的混合物

1.层析缸 2.毛细管 3.喷雾器 4.层析滤纸 5.其他相关器材(如剪刀,铅笔,U形扣等)

B.试剂

44.(12分)某同学想研究氨基酸的分离和鉴定的方法。已知实验室中有0.5%的赖氨酸,脯氨酸,缬氨酸,苯丙氨酸,亮氨酸溶液以及它们的混合液(各组份浓度均为0.5%)。

现提供如下器材和试剂：

A.器材

43.(22分)根据模拟制作重组DNA分子的活动，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRI酶切后，即可获得所需的目的基因和质粒，回答以下问题：(已知EcoRI酶识别序列为GAATTC，识别位点为G||A)

(1)绿色硬纸板(甲DNA分子)的碱基序列为：　　　

……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……　　　

……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……

红色硬纸板(乙DNA分子)的碱基序列为：

　 ……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……　　　

……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……　　　

其中，　　　　　 　DNA分子含有“目的基因”，　　　　　 　DNA分子是“质粒”。

　 　 (2)用剪刀代表进行切割。酶切位点在　　　　 　(a处还是b处)，此化学键称为　　　　　　 　。

(3)请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。

(4)从基因文库中获取目的基因是常用方法，基因文库实际上就是指导入了某种生物不同基因的许多DNA片断的　　　　　　　　　　　　 　的群体。按照其中所含基因的量又可分为　　　　　　　 　文库和　　　　　　 　文库。

(5)基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一，请根据所给的条件完成下列问题：

　　 已知有4种限制性核酸内切酶，其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端，2和3号酶产生的是黏性末端。含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如下图所示：

①　　 请设计酶切方案，构建最佳基因表达载体(重组质粒)

　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

②该重组质粒上有几个复制原点：　　 ，能用PCR技术扩增吗　　　 (能或不能)

③若用酶2和3切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：　　　　 。

　 若用酶2和1切割重组质粒，可以得到几个DNA片段：　　　　 。

42.(14分)某同学的研究性学习课题是“探究影响细菌生长繁殖的因素”。他在培养细菌的过程中，发现了某种细菌(记作R)的周围其他细菌的生长繁殖受到抑制。他把R细菌接种到专门的培养基上进行培养，一段时间后，他除去R细菌，用该培养基再培养其他细菌，结果其他细菌仍然不能在这个培养基上生长和繁殖。根据以上材料回答下列问题：

(1)从生态学的角度分析，R细菌与其周围细菌之间的关系，叫做_________；

(2)该同学假设了以下“造成R细菌的周围其他细菌不能生长和繁殖”的可能原因

A．R细菌占据了其他细菌的生存空间

B．R细菌吞噬了其他细菌　

C．R细菌产生了不利于其他细菌生存的物质

D．R细菌更容易吸收培养基中的物质

你认为以上哪项是最有可能的_______________；

(3)参照上述题目中给出的有关材料，设计你对第(2)题所选择的验证实验：

A．方法步骤：

①　 取两个培养皿，按相同营养成分配制成甲、乙两个培养基。

②　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

③　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

④　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

B．预期结果和结论：

　预期结果:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　结论: