10.人CD20 单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已经培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后，有望使这一特效药的生产成本降至现在的1/10。请回答：
(1)单克隆抗体的制备需先将 和 融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是 。
(2)动物细胞培养需要在含 混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入 等一些天然成分。
(3)转基因技术的核心是 。该过程用到的工具酶有 和 。
解析：单克隆抗体是通过细胞融合技术制备的。此项技术需先获得浆(效应B)细胞，并使之与瘤细胞融合成杂交瘤细胞，此过程可用灭活的病毒诱导。在培养时需提供气体环境，其中含5%CO2，是为了维持培养液的pH。转基因技术的核心是第二步--基因表达载体的构建。答案：(1)经过免疫的B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 可用灭活病毒诱导 (2)95%空气加5%CO2 血清、血浆 (3)基因表达载体的构建 限制性核酸内切酶(限制酶)DNA连接酶
9.下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1) 技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于 培养基。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。
(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用 。
(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞 的特点，又具备淋巴细胞 的特点。
(6)淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化、发育而来的。
(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。
解析：(1)单克隆抗体是通过细胞融合、动物细胞培养制备的，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 (2)由图示信息可知：图中所用的培养基是选择培养基，目的是筛选出杂交瘤细胞，并将杂交瘤细胞分开，筛选之后进行扩大培养，从而获得大量抗体。
(3)单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，可被广泛应用到疾病诊断、治疗和预防等方面。
(4)动物细胞融合除了使用离心、振动、电刺激等物理方法和聚乙二醇等化学方法诱导外，通常还采用灭活的病毒诱导融合。
(5)抗体是由浆细胞分泌的，每一种浆细胞只能分泌一种特异性抗体，要想得到大量的单一抗体，必须将同一种浆细胞大量克隆，但在体外培养的条件下，一个浆细胞不能无限增殖，而骨髓瘤细胞可以在体外无限增殖，因此，通过细胞融合，得到既能分泌抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞。
(6)淋巴细胞是由动物体骨髓中的造血干细胞分化、发育而来的。
(7)杂交瘤细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质，它们是通过主动
输进入细胞内的。
答案：(1)动物细胞培养 (2)选择 (3)特异性强，灵敏度高 (4)灭活的病毒 (5)在体外大量增殖 分泌特异性抗体 (6)骨髓 造血干 (7)主动运输(主动吸收)
8.基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞 ( )
A.AAaa B.AaBb
C.Aabb D.BBbb
解析：基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活仙台病毒处理后，会有三种细胞融合的情况出现，Aa和Aa融合形成的细胞基因型是AAaa，Bb和Bb融合形成的细胞基因型是BBbb，Aa和Bb融合形成的细胞基因型是AaBb。
答案：C
7.以下四种细胞工程技术中培育出的新个体，只有一个亲本遗传性状的方法是 ( )
A.植物组织培养 B.细胞融合
C.动物胚胎移植 D.细胞核移植
解析：植物组织培养的过程是无性生殖的过程，形成的新个体中只有一个亲本的遗传物质。
答案：A
6.(2010·济宁质检)用a表示骨髓瘤细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为 ( )
A.a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养
B.a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养
C.a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养
D.a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养
解析：第一次筛选是选出杂交瘤细胞即ab，第二次筛选是选出产生特异性抗体的ab细胞。
5.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是 ( )
A.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体
B.植物体细胞杂交培育出的新品种一定不是单倍体
C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织
D.单克隆抗体制备过程中，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得
交瘤细胞
解析：制备原生质体应先去掉细胞壁；叶肉细胞经脱分化过程才能形成愈伤组织；制备单克隆抗体时，采用经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合来获得杂交瘤细胞；植物体细胞杂交，培育出的新品种中一定含有两个物种的遗传物质，所以一定不是单倍体。
答案：B
4.单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是 ( )
A.单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位
B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术
C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选
D.只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交
细胞
解析：诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三类方法：生物方法、物理方法和化学方法。
答案：D
3.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 ( )
A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体
B.培养中的人B细胞能够无限地增殖
C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株
D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞
解析：能产生抗体细胞应为浆细胞而不是效应T细胞，瘤细胞才具有无限增殖的特点；人成熟的红细胞，因无细胞核所以进行细胞培养不能形成细胞株。
2.某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是 ( )
A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理
B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸
C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象
D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒
解析：胃蛋白酶最适pH值接近于2，呈酸性，而细胞培养液的pH值接近于中性，所以不能用胃蛋白酶处理。CO2的作用是调节细胞培养液的pH值。由于存在细胞接触抑制现象，在原代培养过程中，会出现停止增殖的现象，需要传代培养获得细胞株和细胞系；病毒在活细胞内才能增殖，不能用培养细胞的培养液进行培养。
1.(2010·苏州模拟)下列关于细胞工程的叙述，不正确的是 ( )
A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D.动植物细胞培养都需要经过脱分化处理
解析：植物细胞培养需要经过脱分化处理，而动物细胞培养不需要，电刺激可诱导植物原生质体或动物细胞融合。用纤维素酶、果胶酶可去除植物细胞壁，用胰蛋白酶可将动物组织分散成单个细胞。小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体。
