6、为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)　　　 如图甲，获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中

的　　　　 处，DNA连接酶作用于　　　 处。(填“a”或“b”)

(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和　　　　 　　法。

(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用　　　　　　　　　　 技术，该技术的核心是　　　　　　　 　　　　。

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的　　　　　　　　　

做探针进行分子杂交检测，又要用　　　　　　 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

(5)如图乙是该耐盐基因表达过程中的一个阶段，图中3和4的核苷酸相同否？说明理由______________________________　　　　　　　　　 ________

答案：(8分)(1)a　　　 a　　 (2)基因枪法(花粉管通道法)

(3)植物组织培养(1分)　 脱分化(去分化)和再分化

(4)耐盐基因(目的基因)　　 　 一定浓度盐水浇灌 (移植到盐碱地中)

(5)不同，3是核糖核苷酸，4是脱氧核糖核苷酸

5、(1)基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答：(3分)

1在基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤有　　　　　　 。(用图解中序号表示 )。

2下列属于基因表达载体组成的是 　　　　　　　　　(写全才给分)　

A．目的基因　　 B．终止密码　　 C．启动子　　 D．标记基因　　 E、终止子　　　 F、起始密码

3迄今为止，　　　　　　　 　技术是转基因动物中采用最多，也是最有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。　

(2)为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法：(4分)

请根据图示信息回答：

1试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物技术有　　　　 　　　和 　　　　　　。

2试管牛培育过程特有的生物技术是　　　　　　　 ，克隆牛培育过程特有的生物技术是　　　　　　　 。　　　　

(3)请回答单克隆抗体制备的有关问题：(3分)

1单克隆抗体制备为什么要向小鼠注入特定的抗原？ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

2单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是　　　　　　　　　　　　 。

3选出的杂交瘤细胞具备　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　 特点。

答案：(1)①②④　　　　 A、C、D、E　　　　 　显微注射 　

(2)动物细胞培养　　 胚胎移植　 体外受精　　 体细胞核移植　

(3) 要获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞　 　

特异性强，灵敏度高 　既能在体外大量增殖，又能分泌特异性抗体

4、

(1) PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：(6分)

1C过程要用到的酶是　　　　　　　　　　 。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

2人类利用PCR技术合成的DNA进行新子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA，并进行PCR扩增，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起，然后利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA控针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲条码吻合。下图为某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA指纹图谱示意图，请推测该小孩真正生物学上的父亲是　　　 为什么？

母亲

孩子

A

B

C

D

(2)(4分)红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离　 纯化　 纯度鉴定。请回答下列有关问题：

　① 样品处理，它包括　　　　 、　　　　 、收集血红蛋白溶液。

　②收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是　　　　 。透析的原理是　　　　 。

答案：⑴ 1TaqDNA聚合酶　　 DNA模板　　 分别与两条模板链相结合的两种引物　 　四种脱氧核苷酸　　 2B　 其子代的遗传物质一半来自父亲，一半来自母亲。

(2)① 红细胞的洗涤　　　 血红蛋白的释放　 ②去除相对分子质量较小的杂质　　 透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在透析袋内

3、下图a示基因工程中经常选用的运载体-- pBR322质粒，Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检查运载体是否导入原本没有Amp^r 和Tet^r的大肠杆菌，将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果(黑点表示菌落)。再将已灭菌的绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果(空圈表示与b对照无菌落的位置)。据此分析并回答：

(1)pBR322质粒的基本组成单位是__________，它控制着_______________等性状。该基因工程中，质粒上的Amp^r、Tet^r称为___________基因。

(2)与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是_____________________________，由此说明目的基因插入了_________中，此大肠杆菌导入了________(填重组、没有重组)质粒。

(3)若用pBR322质粒作为载体，通过基因工程生产食品，是否存在食品安全性问题？试说明理由。_____________________________________________________________

答案：(1)脱氧核苷酸　　 抗氨苄青霉素和抗四环素　 　标记

(2)能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素　　 Tet^r　　 重组

(3)存在　　 Amp^r、Tet^r控制合成的物质在人体内发挥作用，使人体内的细菌抗药性增强，服用的药物药效减弱(或不存在　 Amp^r、Tet^r控制合成的物质被消化而失去作用)(其它合理答案也给分)

2、　　 (1)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请根据图回答下列问题：

①请用箭头把代表各图解的字母按单克隆制备过程的顺序连接起来。

②在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂

　 交瘤细胞具有　　　　 、　　　　　 的特性。

③由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了　　　　　 和　　　　　 的动物细胞工程

　 技术手段。

(2)金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，降低观赏价值。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种。请据图回答：

①获得b并将b连接到a上形成c，常用到的酶有　　　　　　　 。

②通过植物组织培养技术可快速、大量培养该抗病新品种，请简述此技术的基本流程。

答案：(1) ①　　　　　　　　　　　　　　　 (2分)

②在体外大量繁殖　　　 产生特异性抗体

③动物细胞融合　　　 动物细胞培养

(2) ①限制性核酸内切酶和DNA连接酶(2分)

②获得抗病基因的茶花细胞→脱分化→愈伤组织→再分化得到转基因金茶花(2分)

1、为了探究DNA的复制、转录等过程，科学家做了一系列的实验：

实验一 　将大肠杆菌中提取出的DNA聚合酶加到具有足量的四种脱氧核苷酸的试管中。在适宜温度条件培养下，一段时间后，测定其中的DNA含量。

实验二　 在上述试管中加入少量DNA和ATP，在适宜温度条件下培养，一段时间后测定其中的DNA含量。

实验三　 取四支试管，分别放入等量的四种脱氧核苷酸、等量的ATP和等量的DNA聚合酶，再在各试管

中分别放入等量的四种DNA分子，它们分别是枯草杆菌、大肠杆菌、小牛胸腺细胞、T₂噬菌体的DNA。在适宜温度条件下培养一段时间，测定各试管中残留的每一种脱氧核苷酸中的含量。

分析以上实验，回答下列问题：

(1)实验一中　　 填(“能”或“不能”)测定出DNA，原因是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

(2)实验二中　　 填(“能”或“不能”)测定出DNA，加入ATP的作用是　　　　　　　　　　　　　 。 　　　　　　　　

(3)实验三要探究的是　　　　 ，若结果发现残留的四种脱氧核苷酸的量不同，则说明　　　　　　 。　　　　　　　　　　

(4) 如果要模拟DNA的转录过程，试管中应加入　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 等。

答案：(1)不能　 缺少DNA模板和ATP　 (2)能　 提供能量　

(3)各种不同生物的DNA分子的脱氧核苷酸组成是否相同　 不同生物的DNA分子脱氧核苷酸组成不同　

(4)DNA、足量的四种核糖核苷酸、RNA聚合酶、ATP (2分)

36．下图为DNA分子在不同酶的作用下发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是(　 C　 )

　　　　 A、①②③④　　　　　　　　　　 D、①②④③

　 　 C、①④②③　　　　　　　　　　　 D、①④③②

35．应用基因工程方法，可将酵母菌制造成“工程菌”，用于生产乙肝疫苗，在制造该“工程菌”时，应向酵母菌导入下列中的(　 B　 )

　　　　 A、乙肝病毒的表面抗原　　　　　　　　　　　　 B、乙肝病毒的表面抗原的基因

　　　　 C、抗乙肝病毒的抗体　　　　　　　　　　　　　　　 D、抗乙肝病毒抗体的基因

34．限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、Hind Ⅲ和BglⅡ的识别序列和切割位点：

切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是A

A．BamHⅠ和EcoRⅠ　　　　　　 　　　B．BamHⅠ和 Hind Ⅲ

C．BamHⅠ和BglⅡ　　　　　　　　　　 D．EcoRⅠ和 Hind Ⅲ

33.甲图中曲线是正常情况下测定的某好氧性细菌的生长曲线，假设采用了四种处理　 ①用处于对数期的细菌作菌种　 ②连续培养　 ③溶氧不足　 ④在对数期内添加不同种类的适宜培养基。　 这四种处理与乙→戊图曲线对应的是 C

　　 A.①③④②　　　　 B.②①③④　　　　 C.④①③②　　　　　 D.④①②③