3. GFP发出的荧光稳定,检测方便而且对细胞也不会产生明显毒害,因此在基因工程中可

以作为       ,用以追踪多种生物细胞的迁移和变化情况。

(Ⅱ)下面是某科学家用GFP做的相关实验,根据所学知识补充实验过程,并分析回答相

关问题。

课题:研究GFP标记的大鼠神经干细胞移植于损伤脊髓后的迁移情况

目的:观察神经干细胞移植于损伤脊髓后的迁移

方法:

(1)构建含GFP基因的慢病毒载体。

(2)体外培养胎鼠脊髓神经干细胞:取孕14-16天Wistar大鼠,在    条件下取胎鼠脊髓,解剖显微镜下剔除表面软膜和血管,剪碎,再用      进行处理,制成神经干细胞悬浮液,200目铜网过滤,离心,加干细胞培养液,其他条件适宜,进行培养,2-3天换培养液。

(3)用             浸染神经干细胞,将已浸染的神经干细胞以乙交酯一丙交酯共聚物(PLGA)为支架移植入大鼠T9半横断脊髓损伤处。

(4)移植后1个月在荧光显微镜下                 。

结果:荧光显微镜下,神经干细胞球及散在的神经干细胞呈强烈的绿色荧光,各个部位

深浅不一。神经干细胞的迁移移植后1个月,在脊髓损伤的头端和尾端可见发绿色荧光的神经干细胞。

结论:                            。

分析与讨论:

(1)在构建含GFP基因的慢病毒载体过程,需要用到的工具酶有      和      。

(2)动物细胞培养所用的培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和      。

在物理性质上属于        。

 0  335841  335849  335855  335859  335865  335867  335871  335877  335879  335885  335891  335895  335897  335901  335907  335909  335915  335919  335921  335925  335927  335931  335933  335935  335936  335937  335939  335940  335941  335943  335945  335949  335951  335955  335957  335961  335967  335969  335975  335979  335981  335985  335991  335997  335999  336005  336009  336011  336017  336021  336027  336035  447090 

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