摘要： GFP发出的荧光稳定.检测方便而且对细胞也不会产生明显毒害.因此在基因工程中可 以作为 .用以追踪多种生物细胞的迁移和变化情况. (Ⅱ)下面是某科学家用GFP做的相关实验.根据所学知识补充实验过程.并分析回答相 关问题. 课题:研究GFP标记的大鼠神经干细胞移植于损伤脊髓后的迁移情况 目的:观察神经干细胞移植于损伤脊髓后的迁移 方法: (1)构建含GFP基因的慢病毒载体. (2)体外培养胎鼠脊髓神经干细胞:取孕14-16天Wistar大鼠.在 条件下取胎鼠脊髓.解剖显微镜下剔除表面软膜和血管.剪碎.再用 进行处理.制成神经干细胞悬浮液.200目铜网过滤.离心.加干细胞培养液.其他条件适宜.进行培养.2-3天换培养液. (3)用 浸染神经干细胞.将已浸染的神经干细胞以乙交酯一丙交酯共聚物为支架移植入大鼠T9半横断脊髓损伤处. (4)移植后1个月在荧光显微镜下 . 结果:荧光显微镜下.神经干细胞球及散在的神经干细胞呈强烈的绿色荧光.各个部位 深浅不一.神经干细胞的迁移移植后1个月.在脊髓损伤的头端和尾端可见发绿色荧光的神经干细胞. 结论: . 分析与讨论: (1)在构建含GFP基因的慢病毒载体过程.需要用到的工具酶有 和 . (2)动物细胞培养所用的培养液通常含有葡萄糖.氨基酸.无机盐.维生素和 . 在物理性质上属于 .
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日本的下修村、美国的沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有广阔的应用前景。请据下图回答相关问题：
（1）①过程除了用“鸟枪法”直接提取外，还可以用 得到目的基因。③过程通常用的方法是 。
（2）将绿色荧光蛋白基因导入受体细胞需要运载体的帮助。选取质粒作为运载体的原因除了具有1至多个的限制酶切点、具有某些标记基因外，还因为 。
（3）经过④过程后，有的细胞可能导入了重组载体，简单的鉴定方法是利用 就可以把它们筛选出来。
（4）GFP发出的荧光稳定，检测方便而且对细胞也不会产生明显毒害，因此在基因工程中可以作为 ，用以追踪多种生物细胞的迁移和变化情况。
（5）在核移植过程中，供体细胞一般用传到 代以内的转基因体细胞作为受体细胞。
（6）在⑤过程培养重组细胞时，必须模拟细胞在体内生存的良好环境和物质代谢过程，为其提供必须韵营养物质、适宜的酸碱度、渗透压、温度、二氧化碳以及严格 条件。胚胎移植的最佳时期是 。
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