(8分)我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产人生长激素的示意图。pBR322质粒为基因工程中经常选用的载体,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,该质粒上有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的识别和切割位点,如图(已知普通大肠杆菌中不含有pBR322质粒上任何基因;限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同)。回答问题:

(1)过程②为      ,质粒上的抗性基因作用是        
(2)为防止④过程中出现多种重组质粒,一般用两种限制酶分别对目的基因和质粒进行剪切,从而把目的基因和质粒各自剪切出      (不同/相同)的黏性末端。基因表达载体中目的基因除包含以上所描述的结构外,还必须含有       
(3)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ中的任意两种,同时对多个质粒pBR322进行切割,则形成的DNA片段共     种;为提高⑤过程成功率,常用     溶液处理大肠杆菌。
(4)现在用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置,一段时间后,菌落的生长状况如上图所示。甲培养基上能生长的大肠杆菌中含有      基因,与丙相比,乙培养基中少了两个菌落,说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌       

 0  85963  85971  85977  85981  85987  85989  85993  85999  86001  86007  86013  86017  86019  86023  86029  86031  86037  86041  86043  86047  86049  86053  86055  86057  86058  86059  86061  86062  86063  86065  86067  86071  86073  86077  86079  86083  86089  86091  86097  86101  86103  86107  86113  86119  86121  86127  86131  86133  86139  86143  86149  86157  170175 

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