2．某班同学在学完菊花的组织培养内容之后，决定利用课余时间去实践这项技术，培养出美国的菊花来美化教室的环境。

(1)在制备MS固体培养基时先根据__________进行计算。MS培养基含有__________种营养元素。其中__________6种元素属大量元素；__________8种元素属微量元素，能源物质是__________。由于菊花的茎段组织培养比较容易，所以不必加__________。

(2)将分装好的培养基连同培养器械一起进行__________灭菌。

(3)选取菊花的__________部分进行外植体消毒，在消毒时既要考虑__________，又要考虑__________，所以分别用__________的酒精和__________的氯化汞消毒，消毒时间不宜过长。

(4)接种时要特别注意__________，每瓶接种__________块外植体。将接完种的锥形瓶放在__________中培养，培养期间定期消毒。温度控制在__________℃并每日用日光灯光照12 h。

(5)若干天后发现有些锥形瓶中生长出可爱的菊花幼苗，有的锥形瓶中培养失败还长出很多细菌菌落，试分析其原因。幼苗在移栽入土之前需要进行哪些处理工作？

1.根据下列材料回答问题。

人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像种子一样萌发生长，长成植物。人工种子的核心部件是被外层物质包埋的具有类似种子胚功能的胚状体。胚状体不同于一般的种子胚，是由非合子细胞分化形成的类似于胚的结构物。胚状体在一定的条件下，可以通过发育形成植株。胚状体可从悬浮培养的单细胞中得到，也可通过试管培养的愈伤组织、花粉或胚囊获得。将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，便成了所谓的“人工种子”。自从1958年F.C.斯图尔德和J.赖尔特分别对胡萝卜进行诱导得到胚状体至今，约有200多种植物培养出了胚状体。我国利用组织培养技术已成功地在烟草、水稻、小麦和玉米等作物上诱导出了胚状体。各国正着手将人工种子推向商品化。

(1)植物的胚状体是__________的产物。培育胚状体利用了__________这一项生物技术。

(2)包埋胚状体的胶质可看作种子的______________________________部分。

(3)该项技术的成功应用，反映了细胞的__________性。

(4)由人工种子萌发出的植株是否可育？

(5)人工种子的研究和商品化有何意义？

2．(2012·浙江自选)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

―→―→―→―→

请回答：

(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现________色环带。

(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是________灭菌。

A．高压蒸汽                              B．紫外灯照射

C．70%酒精浸泡                  D．过滤

(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。

(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在________中。若不倒置培养，将导致________。

(5)临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的________分解为NH₃和¹⁴CO₂。

1.(2012·山东基本能力)除了高温加热以外，其他灭菌方法还有(　　)

A．紫外线照射　　　　　　    B．真空包装

C．用保鲜膜密闭                     D．添加防腐剂

7．(2011·四川卷—30.Ⅰ)有人通过实验探究某海藻的最佳培养条件，以获得最大生物量(注：生物量指单位体积的藻体干重)。

(1)在有光条件下培养海藻时，培养液中必须含有________，还需定时向培养液通入空气，目的是提供________________________。海藻光合速率随不同光照强度的变化曲线如图，图中B点表示最佳的________培养条件。

(2)该海藻在无光条件下仍能生长，但需在培养液中添加葡萄糖等有机物，目的是提供______________________________。

(3)向培养液中添加葡萄糖配成不同浓度的培养液，在一定光照条件下培养该海藻，测定海藻的生物量如下表：

要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度，还需设计________的实验。

(4)综合上述实验，获得该海藻最大生物量的培养条件是

________________________________________________________________________。

6．(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑____________、____________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、____________、____________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行____________(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和____________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能____________。

(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的____________。

(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是

________________________________________________________________________。

(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

5．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入__________作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基__________(A.影响；B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用__________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于____________________；使用__________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？

________________________________________________________________________。

(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？

(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

4．在现代农业中，常在饲料中加入一定量的尿素来饲养牛等牲畜。因其有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物以尿素作为唯一氮源。某同学设计了如下实验，对能分解尿素的细菌进行分离和计数。

Ⅰ.取样：到屠宰场，在刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先准备好的信封中密封。

Ⅱ.制备培养基：制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多于选择培养基上的数目。由于初次实验，选择了一个较宽的稀释范围。并且每个稀释度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。

Ⅲ.微生物的培养与观察：按稀释度的顺序分别吸取 0.1 mL进行平板涂布操作。将涂布好的培养皿放在30 ℃下培养，并且需要无氧条件。比较两种培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。挑选选择培养基上不同形态的菌落接入含酚红指示剂的培养基中，观察是否产生颜色反应。

Ⅳ.细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取平板计数。

请回答下列问题：

(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的目的是什么？

(2)为什么每个稀释度下需要3个选择培养基？

(3)上述培养时，为什么需要无氧条件？

(4)含酚红的培养基应用的目的是什么？结果会呈现什么样的颜色反应？原理是什么？

(5)计数时应选什么样的平板进行计数？怎样计算出样品中的细菌数目？

3．某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：

(1)对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：__________、__________、__________、__________、__________。其中提供氮源的是__________；提供碳源的主要物质是__________________。

(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的__________。在烧杯中加入琼脂后要不停地__________，防止__________。

(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入__________中灭菌，压力__________kPa，温度__________，时间__________。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应______________________。

(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入__________。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。

(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯__________(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环__________后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入__________℃冰箱中保存。

2．现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料越来越受到青睐。请回答：

(1)果汁饮料的包装瓶上写着105 ℃高温瞬时灭菌的意思是____________________，这样做的目的是____________________。

(2)自己在家中榨的果汁很容易腐败，而果汁包装瓶上写着“不含任何防腐剂，最长保质期为一年”，其中的奥秘是__________。

(3)在果汁加工过程中可添加__________酶来提高出汁率和清澈度。

(4)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了__________的发酵作用，该过程需控制的温度条件是__________。

(5)在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：________________。