5.萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在PH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃15min后失活.根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率.请协助完成“测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率”的实验.
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm).
主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、石英砂恒温水浴锅等.
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖标准.取 7 支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热 2min,取出后按试管号顺序排列.
试剂试管号
1234567
麦芽糖
标准液
(mL)
00.20.61.01.41.62.0
蒸馏水
(mL)
2.0
麦芽糖
含量
(mg)
00.20.61.01.41.62.0
斐林试
剂(mL)
2.02.02.02.02.02.02.0
步骤二:制备酶液.
研磨:5g萌发的小麦种子+少量石英砂+10mL蒸馏水→离心分离:3000转/min,10min→获取酶液
步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴15min,取出后迅速冷却.
步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL 5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略少量的麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min.
步骤五:分别取A、B试管中反应溶液各2mL,向其中分别加入2mL斐林试剂,60℃水浴加热2min后,观察颜色变化.
结果分析:将A试管中颜色与第①步中获得的麦芽糖标准进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率.
分析上述步骤回答:
(1)步骤一的2~7试管中加入蒸馏水的量分别是1.8mL、1.4mL、1.0mL、0.6mL、0.4mL、0mL.(单位mL).
(2)步骤三的实验操作是70℃水浴中15min;.
(3)步骤五的实验操作是分别取A、B试管中反应溶液各2mL,向其中分别加入2mL斐林试剂,60℃水浴加热2min后,观察颜色变化.
(4)实验中B试管所起的具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖..
 0  137339  137347  137353  137357  137363  137365  137369  137375  137377  137383  137389  137393  137395  137399  137405  137407  137413  137417  137419  137423  137425  137429  137431  137433  137434  137435  137437  137438  137439  137441  137443  137447  137449  137453  137455  137459  137465  137467  137473  137477  137479  137483  137489  137495  137497  137503  137507  137509  137515  137519  137525  137533  170175 

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