18.由于人突变细胞中含胸苷激酶(TK)而缺乏HGPRT酶,小鼠正常细胞中含HGPRT酶而缺乏TK,两种细胞均不能在HAT培养基中生长,但可在普通培养基中生长.利用上述两类细胞融合获得杂种细胞,在杂种细胞传代过程中,鼠的染色体被保留下来,人的染色体随机丢失,以至最后只剩一条或几条人染色体(如图,图中数字代表保留的人染色体编号).科研人员运用这一方法确定了胸苷激酶基因所在的染色体.分析回答:

(1)与植物原生质融合过程相比,过程A特有的诱导方法是用灭活的病毒处理.
(2)动植物细胞培养过程中,培养液中添加一定量的抗生素的目的是防止杂菌污染,培养箱中充入5…的CO2气体的主要作用是维持培养液适宜的pH.
(3)若细胞两两融合,则会出现3种类型的融合细胞,过程B用HAT培养基进行培养,其目的是筛选出人鼠融合细胞(或“杂种细胞”).
(4)为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中,人鼠融合细胞应在普通(填“HAT”或“普通”)培养基中传代培养.为检查杂种细胞中含有的人染色体数目和形态,最好选取有丝分裂中期(时期)的杂种细胞进行观察.
(5)若将某次实验获得的各种人鼠杂种细胞分别在HAT培养基中培养,一段时间后,发现在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长,检查杂种细胞中保留的人染色=体情况如下表(表中“+”表示有相应染色体,“-”表示无相应染色体):
杂种细胞           保留的人染色体
2号3号5号9号12号17号21号
A++++-+-
B-+--++-
C+-+-+++
根据表中信息,可推测人细胞中胸苷激酶基因位于17号染色体上.
14.下表中列出了几种限制酶识别程序及其切割位点,图一、图二中箭头表示相关限制酶的酶切位点.


(1)若图二中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因,现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊,科学家要将该基因注射到羊的受精卵中,则发育成的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁.
(2)限制酶SmaⅠ和限制酶XmaⅠ作用的不同点是切割位点不同.
(3)图二中的目的基因D需要同时使用限制酶MseⅠ和限制酶PstⅠ才能获取,而图一所示的质粒无相应的限制酶切位点.所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时,需要对质粒进行改造,构建新的限制酶切位点.试写出构建需要的限制酶切位点的过程(提供构建需要的所有条件):
①首先用EcoRⅠ酶处理质粒;
②然后用DNA聚合酶处理质粒,使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸
③再运用DNA连接酶处理质粒,形成新的限制酶切位点,即可被限制酶MseⅠ识别.
(4)基因工程中的筛选是一个重要的步骤.如图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种培养方法)检测基因表达载体是否导入大肠杆菌.培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有四环素、青霉素.从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是4和6菌落中的细菌.
 0  135528  135536  135542  135546  135552  135554  135558  135564  135566  135572  135578  135582  135584  135588  135594  135596  135602  135606  135608  135612  135614  135618  135620  135622  135623  135624  135626  135627  135628  135630  135632  135636  135638  135642  135644  135648  135654  135656  135662  135666  135668  135672  135678  135684  135686  135692  135696  135698  135704  135708  135714  135722  170175 

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