7.绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能.下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

(1)图中通过过程①②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒.限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-.在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点.
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成黏性末端的过程.(只写出切割后形成的部分即可)
②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?可以连接,理由是由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的).
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射法.
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因.
获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是供体器官不足和免疫排斥.
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:②①③④(用序号表示).
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列   ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)                  ④表达出蓝色荧光蛋白.
6.回答下列与基因工程有关的问题:
Ⅰ.来源于豇豆的胰蛋白酶抑制剂基因(CPTI基因)具有广谱的抗虫特性.但直接把该基因转入农作物后,发现转基因植株中合成的CPTI蛋白质的积累量并没有达到能够强烈抑制害虫的浓度.于是科研工作者在体外对CPTI基因进行了修饰,在其两端分别融合了“信号肽”序列和“内质网滞留信号”序列,在它们的共同作用下,CPTI蛋白质在转基因植株中的积累量明显提高.
(1)在此项基因工程中,供体细胞是豇豆细胞;CPTI基因是人们所需要的特定基因,称为目的基因.
(2)在体外对CPTI基因进行修饰时,首先要用限制酶处理,形成黏性末端.
(3)“信号肽”序列及“内质网滞留信号”序列的化学本质是DNA.
Ⅱ.研究人员欲将目的基因通过质粒导入大肠杆菌细胞内,以表达某种所需的蛋白质.已知质粒中两个抗性基因:A是抗链霉素基因,B是抗青霉素基因.假设目的基因只能插入到A基因中,而所用大肠杆菌不带有任何抗性基因.当完成了基因工程的操作后,经过一段时间的培养,对工程菌进行检测会产生以下三种结果:
①抗链霉素的同时也抗青霉素,这说明质粒已导入,但导入前并未与目的基因发生结合.
②不抗链霉素但抗青霉素,这说明重组的质粒顺利导入受体细胞.
③既不抗链霉素也不抗青霉素,这说明质粒未能导入受体细胞.
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