Question

8．如图所示为动物细胞培养的基本过程示意图．

请回答：
（1）容器A 中放里的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强，易于培养．培养时先要剪碎，然后用胰蛋白酶分散细胞，制成B 瓶中的细胞悬液．将细胞悬液转入C 瓶中进行的初次培养称为原代培养．
（2）细胞正常培养了一段时间后，发现细胞绝大部分死亡，只有极少数细胞存活，这是因为存活的细胞发生了突变，可无限增殖．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型．
（3）C、D 瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的抗生素．培养过程中还需要提供O₂和CO₂ 等气体环境，CO₂的作用主要是维持培养液的PH值．
（4）动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质．下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果．据图可知，培养培养正常细胞一定需要添加血清．

Answer 1

分析 本题主要考查动物细胞培养的过程．
1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．
3、动物培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH．）

解答 解：（1）容器A 中放里的一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强，易于培养．培养时先要剪碎，然后用胰蛋白酶分散细胞，制成B 瓶中的细胞悬液．将细胞悬液转入C 瓶中进行的初次培养称为原代培养．
（2）细胞正常培养了一段时间后，发现细胞绝大部分死亡，只有极少数细胞存活，这是因为存活的细胞发生了突变，可无限增殖．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型．
（3）C、D 瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的抗生素．培养过程中还需要提供O₂和CO₂ 等气体环境，CO₂的作用主要是维持培养液的PH值．
（4）分析曲线图：是否添加血清对于癌细胞的增殖影响不大，而对于正常细胞增殖影响很大，故培养正常细胞一定需要添加血清．
故答案为：
（1）分裂能力强    胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）  原代培养
（2）突变   10   二倍体
（3）抗生素  维持培养液PH
（4）正常

点评 本题主要考查学生对知识的理解和分析能力．细胞株传至50代后，不能再传下去，但有部分存活的细胞一般能够传到40～50代，这种传代细胞叫做细胞株．细胞株细胞的遗传物质没有发生改变．当细胞株传至50代以后又会出现“危机”，不能再传下去．但是有部分细胞的遗传物质发生了改变，而且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞成为细胞系．