3.回答下列有关基因表达和基因工程问题.
如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因.EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离.复制原点是在基因组上复制起始的一段序列.1kb=1000个碱基对长度.请据图回答问题:

(1)图中获得目的基因的方法为生物体细胞中分离或(由限制酶内切得到).
(2)片段D为目的基因中的某一片段,有关叙述正确的是BDE.(多选)
A.若图中的ACT能决定一个氨基酸,则ACT可称为一个密码子
B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处,解旋酶作用中①处
C.若只用这片段中的3个碱基对,可以排列出43种片段
D.就游离的磷酸基而言,该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基
E.同一条脱氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间依次经过脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖
(3)已知UGA为终止密码.据图判断,转录的终止位点最可能在图示目的基因中片段D的右侧(左/右)侧.
(4)图中能作为目的基因运载体最理想的质粒是B(A/B/C),请据图分析,其他两种质粒一般不能作为运载体的理由是质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制.
(5)用EcoR I完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒,并进行电泳观察,可出现长度为1.1kb和5.6 kb,或者3.1kb和3.6kb的片段. (重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计).
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