15.回答下列有关微生物与基因工程有关的问题
(1)基因工程的第一步是获取目的基因,获取的方法包括从某种生物体细胞中分离和化学方法人工合成.如果要想获取人的胰岛素基因,只能用化学方法人工合成,具体的做法是从人体胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA,再通过逆转录过程即可获得目的基因.
(2)基因工程的第二步是将目的基因和运载体重组,重组时需要选择合适的限制酶和DNA连接酶.常用的运载体是细菌质粒(如图1所示),质粒中ori为质粒复制所必需的DNA序列,启动子是使转录开始的一段DNA序列,终止子是提供转录终止信号的DNA序列.青霉素抗性基因作为标记基因,以便于筛选.质粒上还有多种限制酶的切点,若目的基因上也有上述质粒中相应限制酶的切点,为避免目的基因自身的环化并能与图中质粒准确重组,可选用的限制酶是B
A.NdeI和XbaI         B.NdeI和BamHI       C.XbaI                D.PstI               E.BamHI

(3)基因工程的第三步是将重组质粒导入受体细胞,例如,转基因动物常用的受体细胞为受精卵.
(4)基因工程的第四步是筛选出导入重组质粒的受体细胞.
①如用大肠杆菌作为受体细胞,则该大肠杆菌中不应含有青霉素抗性基因,请阐述其原因?若含有则会干扰筛选.
②培养导入了重组质粒的大肠杆菌时,需配帛培养基.该培养基除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入的物质有B.D(多选)
A.细胞分裂素  B.琼脂  C.噬菌体  D.青霉素
③培养基配制和灭菌时,灭菌与调节PH的先后顺序是先调节PH后灭菌;
一般对配置的培养液采用高压灭菌法灭菌.
④微生物接种培养时,可采用两种方法.如图2为接种后微生物培养的效果图.那么获得图A效果的接种方法是涂布法,获得图B效果的接种方法是划线法.
(5)与大肠杆菌相比,嗜热菌具有的特点是AC.(多选)
A.对青霉素不敏感          B.对真核生物的亲缘关系更远
C.细胞的DNA中,碱基G和C含量较高,较稳定  D.没有菌毛和质粒.
12.苹果干腐病是一种名为茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病,病菌通常由枝条伤口入侵感染,在伤口处形成溃疡.某中学的科研小组计划分离出该真菌,并进行药物防治实验,为苹果干腐病的防治提供合理的建议.经过查阅资料,确定了分离时所用的PDA培养基配方,如表所示:
物质马铃薯葡萄糖自来水氯霉素
含量200g20g1000mL0.3g
该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍匐菌丝,绒毛状.
(1)要获得菌落,则上表中还应添加的成分是琼脂(或凝固剂).氯霉素的作用是抑制细菌等杂菌的生长.培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板.等平板冷却凝固后,将平板倒置放置,以防止冷凝水污染培养基.
(2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1cm2的患病组织,并用0.1%的升汞进行消毒,置于培养基中心,在合适条件下进行培养,共培养五组.待菌落形态特征稳定后,用平板划线法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目.
①选取菌落数目稳定的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目.
②记录结果如下:
小组0.5%苦水碱剂40%福美砷清水
菌落数目2817
从结果分析可知,0.5%苦水碱剂能很好的抑制该真菌的生长,适合防治苹果干腐病.
 0  127113  127121  127127  127131  127137  127139  127143  127149  127151  127157  127163  127167  127169  127173  127179  127181  127187  127191  127193  127197  127199  127203  127205  127207  127208  127209  127211  127212  127213  127215  127217  127221  127223  127227  127229  127233  127239  127241  127247  127251  127253  127257  127263  127269  127271  127277  127281  127283  127289  127293  127299  127307  170175 

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