2.研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白是一种跨膜蛋白,在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达.抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段.图1表示H蛋白的结构,胞外区具有抗原特异性,图2示抗H蛋白单克隆抗体的制作过程,图中的“+”表示含有、“-”表示没有,Ig表示抗体.

(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中低表达(填“低表达”或“高表达”).制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,最简便的做法是根据H蛋白胞外区结构特点构建目的基因,转入原核细胞表达并提纯.
(2)将H蛋白注射到小鼠体内,从该小鼠的脾脏中分离浆细胞(免疫后的B细胞、B细胞)细胞与骨髓瘤细胞进行融合,使用的化学诱导剂是PEG(聚乙二醇).
(3)将融合细胞在选择培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长.将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,应用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测,从而筛选出能产生抗H蛋白抗体的杂交瘤细胞细胞.
(4)在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中,为避免有害代谢产物的积累,常采取的措施是定期更换培养液.
(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞.这充分体现了单克隆抗体特异性强(识别抗原部位专一)的特点.
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