Question

2．研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白是一种跨膜蛋白，在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达．抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段．图1表示H蛋白的结构，胞外区具有抗原特异性，图2示抗H蛋白单克隆抗体的制作过程，图中的“+”表示含有、“-”表示没有，Ig表示抗体．

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中低表达（填“低表达”或“高表达”）．制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，最简便的做法是根据H蛋白胞外区结构特点构建目的基因，转入原核细胞表达并提纯．
（2）将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中分离浆细胞（免疫后的B细胞、B细胞）细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂是PEG（聚乙二醇）．
（3）将融合细胞在选择培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长．将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测，从而筛选出能产生抗H蛋白抗体的杂交瘤细胞细胞．
（4）在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中，为避免有害代谢产物的积累，常采取的措施是定期更换培养液．
（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞．这充分体现了单克隆抗体特异性强（识别抗原部位专一）的特点．

Answer 1

分析 单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．
诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）．

解答 解：（1）根据题意可知，H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达，因此原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中低表达；由于抗体主要存在于细胞外液中，因此根据H蛋白的结构图可知，若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因，由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区．
（2）将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中分离 浆细胞（免疫后的B细胞、B细胞）细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化学诱导剂是 PEG（聚乙二醇）．
（3）将融合细胞在选择培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长．将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用 抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测，从而筛选出 能产生抗H蛋白抗体的杂交瘤细胞．
（4）在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中，为避免有害代谢产物的积累，常采取的措施是 定期更换培养液．
（5）单克隆抗体的优点是特异性强，灵敏度高、化学性质单一等特点．
故答案为：
（1）低表达   胞外   
（2）浆细胞（免疫后的B细胞、B细胞）   PEG（聚乙二醇）
（3）抗原-抗体杂交   能产生抗H蛋白抗体的杂交瘤细胞
（4）定期更换培养液   
（5）特异性强（识别抗原部位专一）

点评 本题结合抑制癌症的材料考查了单克隆抗体的相关知识，要求考生能够从题干和题图中获取有效解题信息；识记单克隆抗体的制备过程以及细胞融合的诱导技术，识记单克隆抗体的优点等方面的知识．