7.限制性核酸内切酶(也称限制酶)是基因工程中常用的工具酶,不同的限制酶用于切割不同的DNA片断,请据以下资料回答问题:
(1)某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和SmaⅠ消化,然后用这两种酶混合消化,得到如下片段(kb为千个碱基对):
HindⅢ2.5kb,5.0kb              SmaⅠ2.0kb,5.5kb
HindⅢ和SmaⅠ2.5kb,3.0kb,2.0kb
限制酶HindⅢ和SmaⅠ在此DNA分子中共有一个识别序列.两酶混合消化的片段再用限制酶EcoRⅠ消化,结果导致凝胶上3.0kb的片段消失,产生1.5kb的新片段.请指出限制酶EcoRⅠ的切割位点有一个.
(2)现有一长度为1000碱基对(by)的DNA分子,用限制酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000by,说明此DNA分子为环状(线性或环状),用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子,用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子.该DNA分子的酶切图谱是(要求写出酶名称并标明长度)
(3)基因表达载体的构建是基因工程的关键步骤之一,已知有4种限制酶,其中1号和4号切割DNA后产生的是平末端,2号和3号酶切产生的是黏性末端.含目的基因的DNA片段和质粒的酶切序列如图所示:

请设计一个酶切方案,构建最佳基因表达载体(重组质粒):目的基因用2和4两种酶切;而质粒用1和2 两种酶切割,再用DNA连接酶进行连接.
 0  116505  116513  116519  116523  116529  116531  116535  116541  116543  116549  116555  116559  116561  116565  116571  116573  116579  116583  116585  116589  116591  116595  116597  116599  116600  116601  116603  116604  116605  116607  116609  116613  116615  116619  116621  116625  116631  116633  116639  116643  116645  116649  116655  116661  116663  116669  116673  116675  116681  116685  116691  116699  170175 

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