17.如图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒.限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点.在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接?可以连接理由是因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的.
(2)以上图示中基因工程的核心是②(用序号表示),除了目的基因和标记基因外,其上还应包括启动子和终止子.
(3)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射技术.目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上.这需要检测才能确定,检测采用的方法是DNA分子杂交技术.
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:②①③④(用数字表示).
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白.
16.除CO2浓度外,温度、光照强度等因素都能影响光合作用.某小组用伊乐藻进行光合作用实验:将一枝伊乐藻浸在水族箱中,以光下单位时间该枝条放出的气泡数(O2)作为光合速率.用太阳灯作光源,当太阳灯与水族箱的距离从75cm缩短到45cm时,虽然产生一定量气泡,但数量基本无变化,而光强增加了278%;只有从45cm移到15cm这一短距离时,光合速率才随距离的缩小而增加.
(1)解释实验结果:从75cm缩短到45cm时,光照强度增加,那么,最可能是由于温度较低限制了暗(光、暗)反应的速率,进而影响了气泡的产生量.从45cm移到15cm,光合速率增加的主要非生物因素是光和温度.
(2)对于上述现象,小组成员分别提出了如下的假设:①距离大于45cm时,光太弱导致植物不能进行光合作用;②伊乐藻在弱光下光合作用较强,强光则抑制光合作用;③伊乐藻利用室内的散射光进行光合作用.
A.你赞同上述的假设③(填数字序号).
B.现有绿色安全灯、白色纱布、伊乐藻、相同水族箱等若干材料用具,请完善实验方法步骤,初步验证你所支持的假设.
a.将状况相同的健康伊乐藻各1枝分别放入3个相同的水族箱,水族箱分别编号为甲、乙、丙.
b.将甲放入有绿色安全灯的暗室内;乙、丙置于有自然散射光的室内,乙装置外包裹白色纱布(留下观察窗口).
c.控制室内温度相同.
d.记录各装置单位时间内伊乐藻放出的气泡数甲装置不放出气泡.
支持你所赞同的假设的结果应该是丙装置放出气泡最快.
13.矮牵牛花色丰富,易于栽培,是世界上销量最大的花卉之一.科研人员尝试通过增加更多控制色素形成的基因(CHS基因)使红花矮牵牛花瓣颜色加深.
(1)科研人员首先从红花矮牵牛的花瓣细胞中提取mRNA,经反转录获得CHS基因.然后将CHS基因与运载体结合,通过农杆菌转化法,将其导入植物叶片中.将筛选出的成功导入CHS基因的叶片利用植物组织培养技术培育获得转基因的矮牵牛植株.
(2)与预期结果相反,许多转基因植株的花色为白色.为探究其原因,研究人员从白花转基因植株和红花(非转基因)矮牵牛植株的细胞中分别提取总RNA,然后以标记的CHS基因作为探针进行分子杂交,结果发现转基因植株中CHS基因的RNA量减少.由此推测,生物体外源CHS基因的转入并未增加CHS基因的表达,甚至连细胞的内源CHS基因表达也受到抑制,从而使花色为白色.
(3)对上述现象的解释有两种观点.第一种观点认为可能由于RNA聚合酶未能识别基因首端的启动子部位,从而不能进行转录.第二种观点认为由于某种原因细胞内转录出了部分与mRNA序列互补的反义RNA,反义RNA与mRNA形成了双链RNA,从而降低了游离mRNA的含量.
(4)科研人员发现自然界中存在一种CHS基因表达受抑制的矮牵牛品种.它的表现型与上述转基因植物相似,研究发现它的细胞中CHS基因转录正常,结合此现象推测,上述对转基因矮牵牛开白花的两种解释中第2种成立的可能性更大.
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