补充正常凝血因子F8可以治疗甲型血友病，因此可以利用转基因技术人工生产F8．
某种大肠杆菌的质粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（图2），大肠杆菌的DNA分子中则含有β-半乳糖酶ω片段序列（图1），由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列，可以使培养基中含有X-gal底物转变成蓝色产物，当缺少任意一个α或ω片段序列，X-gal底物不能转变成蓝色产物．HindⅢ、EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶，如图3中箭头所指为三种限制酶的切点．

（1）要能筛选出转基因菌种，应选用的限制性内切酶是，选择的依据是
（2）限制酶作用于DNA的部位是
A．氢键           B．糖苷键          C．磷酸二酯键          D．肽键
（3）控制F8的基因也可以通过人体细胞相应的mRNA来合成，该合成的过程称为．
将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后，再将大肠杆菌接种到含有X-gal底物的培养基培养一段时间后，培养基中出现较多的蓝色菌落，这是因为．

在一个海岛上，一种海龟中有的脚趾是连趾（ww），有的脚趾是分趾（WW、Ww），连趾便于划水，游泳能力强，分趾则游泳能力较弱．若开始时，连趾和分趾的基因频率各为0.5，当海龟数量增加到岛上食物不足时，连趾的海龟容易从海水中得到食物，分趾的海龟则不易获得食物而饿死，若干万年后，基因频率变化成W为0.2，w为0.8．请问：
（1）该种群中所有海龟所含的基因称为该种群的．基因频率变化后，从理论上计算，海龟种群中连趾占整个种群的比例为；分趾的海龟中杂合子占整个种群的比例为．
（2）导致海龟种群的基因频率发生变化的原因是什么？．
（3）这种基因频率的改变，是否产生了新的物种？请简述理由．

回答下列有关细胞的问题．
洋葱（2n=16）为二倍体植物．为比较不同处理方法对洋葱根尖细胞分裂指数（即视野内分裂期细胞数占细胞总数的百分比）的影响，某研究性学习小组进行了相关实验，实验步骤如下：
①将洋葱的老根去除，经水培生根后取出．
②将洋葱分组同时转入质量分数为0.01%、0.1%的秋水仙素溶液中，分别培养24h、36h、48h；秋水仙素处理停止后再转入清水中分别培养0h、12h、24h、36h．
③剪取根尖，用Carnoy固定液（用3份无水乙醇、1份冰乙酸混匀）固定8h，然后将根尖浸泡在1mol/L盐酸溶液中5-8min．
④将根尖取出，放入盛有清水的培养皿中漂洗．
⑤用石炭酸-品红试剂染色．
⑥制片、镜检、计数、拍照．
实验结果：不同方法处理后的细胞分裂指数（%）如下表．

秋水仙素溶液		清水培养时间
质量分数（%）	时间（h）	0	12	24	36
0.01	24	10.71	13.68	14.19	14.46
	36	9.94	11.99	13.59	13.62
	48	7.98	10.06	12.22	11.97
0.1	24	7.74	9.09	11.07	10.86
	36	6.12	7.87	9.98	9.81
	48	5.97	6.78	7.98	8.56

（1）步骤③中“将根尖浸泡在1mol/L盐酸溶液中”的作用是．
（2）步骤⑥为了获得相应的观察视野，镜检时正确的操作过程是．
（3）根据所学的知识推测，石炭酸-品红试剂是一种性染料．
（4）根据上表结果可以得出如下初步结论：
①质量分数为秋水仙素溶液诱导后的细胞分裂指数较高；
②本实验的各种处理中，提高细胞分裂指数的最佳方法是．
（5）如图为一位同学在步骤⑥所拍摄的显微照片，形成细胞a 最可能的原因是．
（6）现有未贴标签且染色体数目相同的三个细胞有丝分裂两个时期的6块装片，编成1～6号，且已知1、3号确定为同一细胞有丝分裂的两个时期，其他4块装片分别表示另两个细胞有丝分裂的两个时期，某同学按顺序观察，结果如下：

编号	观察结果
1与5	中心体发出星射线，染色体散乱排列
2	细胞中部凹陷
3与6	细胞中部形成了细胞板
4	细胞两极发出纺锤丝，染色体散乱排列

其中表示动物细胞有丝分裂前期与末期的装片依次是．
A．1、3号B．4、6号C．5、2号D．4、2号．

回答有关微生物的问题
急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，故检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施．
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种接种方法称为．下面4种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是．

（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？．原因是．
（3）如分别取0.1mL已稀释10³倍的水样分别涂布到3个培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为．
（4）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产气．现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？．
（5）为进一步分离大肠杆菌，需将检测出大肠杆菌的发酵管转种在加入的培养基中，培养一段时间，大肠杆菌菌落可呈现出．
（6）手足口病的病原体是柯萨奇病毒．如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现．基于水样中病毒DNA极少，故可通过技术（全称）增加病毒DNA片段，然后进行检测．

回答关于基因工程的问题
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防．疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1．科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如图所示．

（1）口蹄疫病毒的VP1蛋白进入动物体内，能引起机体产生特异性免疫反应．VP1蛋白在免疫反应中称为．
（2）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VP1基因可用的方法合成DNA，再用限制性核酸内切酶将VP1基因片段切下．

（3）如图所示，若用2种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从合成的DNA上切下VPI目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），那么所形成的重组质粒pZHZ2．

A．既能被E也能被F切开               B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开           D．能被F但不能被E切开
（4）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O．5kb．若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据下表所列酶切结果判断VPI目的基因的大小为kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中．

G	H
1.6kb	1.2kb
3.1kb	3.5kb

（5）上述目的基因模板链中的TGA序列对应1个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是．
（6）过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和等激素外，还需要添加 筛选出含有重组质粒的叶片小段．
（7）获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定．具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射1次，3次后检测豚鼠血液内产生的的数量．为了使结果可信，应设2组对照，分别注射 和．

图1是仙人掌类植物特殊的CO₂同化方式，吸收的CO₂生成苹果酸储存在液泡中，液泡中的苹果酸经脱羧作用释放CO₂用于光合作用；图2表示不同地区A、B、C三类植物在晴朗夏季的光合作用日变化曲线；图3表示B植物不同光照强度条件下O₂和C0₂的释放量．请据图分析并回答：

（1）图1所示细胞在夜间能产生ATP的场所有，物质a表示．图1所示植物对应图2中的类植物（填字母），从生物进化的角度看，该特殊的CO₂同化方式是的结果．
（2）图2中的B植物中午12点左右出现的光合作用暂时下降，其原因是．
（3）图2中的A类植物在10～16时（能/不能）进行光合作用的暗反应，原因有．
（4）图2中的C植物光合作用速率，除了受光照强度温度等外界环境因素的影响，还受到其内部因素的影响．请写出两个内部影响因素．
（5）从图3可知，若控制B植物幼苗的光照强度为c，且每天光照12h，再黑暗12h交替进行，则B植物幼苗能否正常生长？答：，原因是．

果蝇由于容易饲养且繁殖速度快，因而广泛应用于遗传学研究的各方面．如图为雄果蝇染色体图解，请据图分析并回答下列问题：
（1）正常情况下（包括正常的分裂状态）果蝇体细胞内最多有 个染色体组．
（2）如果将果蝇的一个具有分裂能力的体细胞放在³²P标记的脱氧核苷酸培养液中，在第二次细胞分裂的中期，发现一条染色单体中只有一条脱氧核苷酸链具有放射性，则其姐妹染色单体有条链具有放射性．
（3）摩尔根通过杂交实验发现控制果蝇眼色的基因（红眼A、白眼a）位于X染色体上，他的学生蒂更斯将白眼雌蝇与红眼雄果蝇交配，在其子代中发现一只白眼雌蝇，取其体细胞制成染色体组成图，发现起性染色体组成为XXY，从减数分裂过程中分析可能的原因是．
（4）果蝇的眼色由两队独立遗传的基因（D、d和B、b）控制，其中B、b仅位于X染色体上．A和B同时存在时果蝇表现为红眼，B存在而A不存在时为粉红眼，其余情况为白眼．
已知一只纯和粉红眼雌果蝇与一只白眼雄果蝇杂交，F₁代全为红眼．则
①亲代雌果蝇的基因型为，F₁代雌果蝇能产生种基因型的配子．
②将F₁代雌雄果蝇随机交配，使得F₂代粉红眼果蝇中雌雄比例为，在F₂代红眼雌果蝇中杂合子占的比例为．
（5）摩尔根研究黑腹果蝇时发现，刚毛基因（B）对截刚毛基因（b）为完全显性．现有各种果蝇若干，请利用一次杂交实验来推断这对等位基因是位于X、Y染色体的同源区段还是仅位于X染色体上，请写出遗传图解，并简要说明推断过程．

正常基因可以控制合成凝血因子F8，甲型血友病的产生是因为控制合成凝血因子F8的基因的中间部分碱基缺失，不能合成凝血因子F8．为了探明Ⅳ-2的病因，医院对上述遗传系谱图中的Ⅲ、Ⅳ代成员的该等位基因片段进行了PCR扩增，然后对扩增产物进行凝胶电泳，电泳的结果如图：
（1）从DNA分子上将上述相关基因片段取出，需要酶．
（2）Ⅲ-3的基因型是（只考虑血友病及其相对性状）．
（3）根据电泳结果与遗传系谱图，推论Ⅳ2的无血友病XXY症的形成原因．

请分析回答下列有关遗传问题：
Ⅰ、果蝇是常用的遗传研究材料．
（1）如果将果蝇的一个具有分裂能力的体细胞放在含³²P标记的脱氧核苷酸培养液中，在第二次细胞分裂的中期，发现一条染色单体中只有一条脱氧核苷酸链具有放射性，则其姐妹染色单体有条脱氧核苷酸链具有放射性．
（2）果蝇的某一对相对性状由等位基因（R，r）控制，其中一个基因在纯合时能使合子致死（注：RR，X^rX^r，X^rY等均视为纯合子）．有人用一对果蝇杂交，得到F₁代果蝇共185只，其中雄蝇63只．若F₁代雌蝇仅有一种表现型，则致死基因是，F₁代雌蝇基因型为．
（3）上图所示果蝇与隐性类型的雄果蝇测交，产生子代基因型为Aaee的几率是40%，则该果蝇A-e或a-E间的交换值是．
（4）若A（a）和E（e）这两对基因共同控制果蝇翅膀的颜色，A-E-为黑色，a a e e为白色，其余为灰色．如果如图的雌果蝇与翅色基因型相同的雄果蝇进行杂交，所生后代中，产生灰色翅的个体占后代的比例为．
Ⅱ、下图为甲、乙、丙三种遗传病在某家族中的遗传系谱图．已知甲病为伴X遗传病，4号、5号个体不携带甲、乙、丙三种遗传病的致病基因．请分析回答：（假设连锁基因不发生互换） 
（1）甲病为伴X性遗传病，在乙、丙的致病基因中能与甲致病基因遵循自由组合规律的是．
（2）如果Ⅱ5与Ⅱ6再生一个小孩，则该小孩正常的概率是；如果Ⅱ8与Ⅱ9再生一个男孩Ⅲ16，则该小男孩同时患有乙、丙两种病的概率为．

回答下列有关细胞分裂的问题．
不同的细胞周期长短不一．先利用³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸培养某种细胞一段时间后再移至普通培养基中培养，不同间隔时间取样，进行放射显影，在显微镜下观察计数，统计标记细胞的百分数．A：细胞核开始被标记；B：被标记细胞X开始进入分裂期；C：细胞X着丝点开始分裂；D：细胞X分裂成两个子细胞，被标记细胞数目在增加；E：标记细胞第二次进入分裂期；F：被标记细胞的比例在减少；G：被标记细胞的数目在减少．试回答：

（1）该细胞分裂一次平均经历的时间为h．实验开始时细胞核中被标记的物质是，图1中期（用图中字母表示）DNA分子稳定性最低，适于进行诱发突变．
（2）被标记的细胞比例减少的原因；
被标记的细胞数目减少的原因．
（3）图2分裂状态位于图甲的（用图中字母表示）期的前段，细胞内含有个染色体组．