红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如图
(1)图中①所指的是
 
技术.
(2)图中②所指的物质是
 
,③所指的物质是
 

(3)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生
 
末端.若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生
 
(相同,不同)粘性末端的限制酶.
(4)构建的表达载体含有人EP0基因及其启动子、
 
 
等,其中启动子是
 
酶识别和结合的位点.
(5)为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为
 

(6)将构建好的基因表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞系常采用
 
法.如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的
 
中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的
 
上.
(7)检测 rhEPO的活性需用抗rhEPO单克隆抗体.分泌单克隆抗体的
 
细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成单克隆抗体的优点是
 
并可大量制备.
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