Question

8．采用植物组织培养转基因植株的实验步骤中，不需要的是（　　）

• A． 用携带目的基因的农杆菌侵染的植物细胞做外植体
• B． 用选择培养基筛选导入目的基因的细胞
• C． 用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生质体融合
• D． 用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

解答 解：A、将基因表达载体导入植物叶肉细胞常用的方法是农杆菌转化法，A正确；
B、由于重组质粒中含有标记基因，所以可用选择培养基筛选导入目的基因的细胞，B正确；
C、用聚乙二醇诱导转基因植物细胞的原生质体融合，将得到多倍体植株，发生染色体变异，所以不需要，C错误；
D、利用不同比例的生长素和细胞分裂素，可以诱导愈伤组织形成不定根或不定芽，D正确．
故选：C．

点评 本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤及应用，能运用所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．