Question

13．应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现．请回答下列问题：
（1）在培育转基因牛的过程中，用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶，基因工程的核心步骤是构建基因表达载体．在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有启动子，它是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（2）动物细胞培养过程中，培养环境中除须提供O₂外，还须混入一定量的CO₂，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，可以在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的杂菌污染．
（3）单克隆抗体与血清抗体相比较，其最主要的优点在于特异性强、灵敏度高、可大量制备．

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．

解答 解：（1）基因工程的操作工具包括限制酶、DNA连接酶和运载体，其中限制酶和DNA连接酶是工具酶；基因工程的核心步骤是构建基因表达载体；在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有启动子，它是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（2）动物细胞培养过程中，培养环境中除须提供O₂外，还须混入一定量的CO₂，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，可以在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的杂菌污染．
（3）单克隆抗体与血清抗体相比较，其最主要的优点在于特异性强、灵敏度高、可大量制备．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶      构建基因表达载体     启动子
（2）维持培养液的pH      抗生素     
（3）特异性强、灵敏度高、可大量制备

点评 本题考查基因工程、动物细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及操作步骤；识记动物细胞培养的条件；识记单克隆抗体的优点，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．