题目内容

16．Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）．请回答下列有关问题：

（1）过程②利用的技术是早期胚胎培养，过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是ES细胞．
（2）过程③中获取的目的基因是（正常的）Rag2基因，可以根据该基因的脱氧核苷酸序列（或碱基对序列或遗传信息）设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段．按此方法和图示技术流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有限制性酶核酸内切酶、DNA连接酶和胰蛋白酶、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）等．
（3）图中造血干细胞中的遗传物质至少有三个来源．为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．图中所述克隆技术属于治疗性克隆．

分析 分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解，其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞．

解答 解：（1）过程②利用的技术是早期胚胎培养，过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是 ES细胞．
（2）图示利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，可推知过程③中获取的目的基因是（正常的）Rag2基因．步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．分离、培养ES细胞过程中需要用胰蛋白酶分散细胞．PCR技术扩增过程中用耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）．基因导入过程中需要用限制性酶核酸内切酶、DNA连接酶．
（3）图中造血干细胞中的遗传物质至少有3个来源：上皮细胞、卵母细胞和Rag2基因．为检测Rag2基因的表达情况，可采用抗原-抗体杂交法，即提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质（抗原），用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．根据图形分析可知：基因导入在体外进行的，因此，该治疗方式属于体外基因治疗．图中所述克隆技术也属于治疗性克隆．
故答案为：
（1）早期胚胎培养    ES细胞
（2）（正常的）Rag2基因   脱氧核苷酸序列（或碱基对序列或遗传信息） 胰蛋白酶、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）
（3）三   蛋白质  治疗

点评 本题结合图解，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；识记核移植的具体过程；识记体外受精的具体过程及早期胚胎发育的过程，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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8．如图是细胞膜的亚显微结构模式图，A、B为运输方式，a、b为运输的物质．下列关于细胞膜的相关叙述不正确的是（　　）
A．A、B两种运输方式均体现了细胞膜的选择透过性
B．吞噬细胞与T细胞之间的信息传递离不开①的识别
C．在兴奋产生和传导过程中，b可代表K+
D．当抗利尿激素增多时，肾小管壁细胞A活动会增强
4．培养微生物的实验原理有：
①根据微生物的营养需要选择多种原料配置培养基，培养基还要有适宜的PH．常用牛肉膏蛋白胨培养基培养某些细菌；木屑培养基培养平菇黑木耳等食用菌．
②配置好的培养基必须经过灭菌．灭菌指杀死一定环境内所有的微生物的细胞、芽孢和孢子．实验室最常用的灭菌法是高压蒸汽灭菌法，接种环接种针是用火焰灼烧灭菌的．
③将某种微生物接种在彻底灭菌的培养基上，经过一段时间的培养后，就能够得到生长良好的菌体．
11．下列有关实验操作流程的叙述中，错误的是（　　）
A．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B．腐乳制作过程可表示为让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制
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D．果酒制作的实验流程是挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒
1．下列关于生物多样性及全球性生态环境问题的说法中，正确的是（　　）
A．自然保护区有丰富的动植物资源，这里所有生物构成了生物多样性
B．将受灾地的珍稀动物迁入自然保护区加以保护是保护生物多样性的最有效的措施
C．全球性生态环境问题主要包括全球气候变暖、水资源短缺、土地荒漠化和生物多样性锐减等
D．具有食用、药用和工业原料等以及对生态系统的重要调节功能属于生物多样性的直接价值
8．下列有关实验或调查的叙述，错误的是（　　）
A．设计探究酶的专一性实验时，自变量可以是底物不同
B．统计显微镜下各期细胞数占计数细胞总数的比例，能比较细胞周期各期时间的长短
C．选取经低温诱导的洋葱根尖制成的临时装片，在显微镜下观察不到联会现象
D．叶绿体中色素提取过程中加入无水乙醇越多，叶绿体色素提取液的绿色越深
5．下列说法正确的是（　　）
A．由于碱基对的改变而引起DNA分子结构的改变就是基因突变
B．基因突变会改变基因的种类及基因在染色体上的位置
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B．囊性纤维病影响人的寿命与选偶，预计该地区囊性纤维病携带者的基因型频率不变
C．III8为红绿色盲携带者的概率是$\frac{1}{4}$
D．Ⅱ6和Ⅱ7的子女为囊性纤维病患者的概率是$\frac{1}{132}$

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