题目内容
在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。右图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答:![]()
(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、______、将目的基因导入受体细胞、__________。
(2)A过程需要的酶有 和 。
(3)要把重组质粒导入土壤农杆菌,首先必须用__________处理土壤农杆菌,使土壤农杆菌转变为__________态;然后将 在缓冲液中混合培养完成转化过程。
(4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后,将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]_________________和[E]_________________。如要确保再生植株中含有抗虫基因,可在C过程的培养基中加入_________________。
(5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_____________。这需要通过检测才能知道,检测采用的方法是_________________。
(12分)
(1)基因表达载体构建 目的基因的检测与鉴定
(2)限制酶 DNA连接酶 (3)Ca2+ 感受 重组质粒和感受细胞
(4)脱分化 再分化 卡那霉素 (5)目的基因是否插入受体细胞的DNA分子上 DNA分子杂交技术
解析试题分析:(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
(2)构建重组质粒需要限制酶和DNA连接酶。
(3)如果受体细胞为细菌,需用Ca2+处理细菌,使细菌转变为感受态,然后将重组质粒和感受细胞放在缓冲液中完成转化过程。
(4)离体植物组织需经过[C]脱分化和[E]再分化过程培育成植株;由于质粒上含卡那霉素抗性基因(kan),所以要确保再生植株含有抗虫基因,需在培养基中加入卡那霉素进行筛选。
(5)目的基因在棉花植株内维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入受体细胞的DNA分子上,需通过DNA分子杂交技术进行检测。
考点:本题考查基因工程和植物组织培养的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构的能力。